【实验目的】
通过急性动物实验,观察胰液和胆汁分泌的调节机制。
【实验原理】
胰液、胆汁的分泌是受神经和体液双重因素的调节。与神经调节相比较,体液调节更为重要。十二指肠黏膜在稀盐酸和蛋白质分解产物及脂肪的刺激作用下,可以产生促胰液素和胆囊收缩素。促胰液素主要作用于胰腺导管的上皮细胞,引起水和碳酸氢钠的分泌;而胆囊收缩素主要引起胆汁的排出和促进胰酶的分泌。此外,胆盐(或胆酸)也可使肝脏分泌胆汁,称为利胆剂。
【实验对象】
狗。
【实验用品】
哺乳类动物手术器械,狗手术台,生物信号采集系统,气管插管,胰管插管,胆管插管,静脉插管,注射器,乳胶管,T形管,弹簧夹,3%戊巴比妥钠,0.5%盐酸溶液,粗制促胰液素[注]10ml,胆囊胆汁1ml。
【实验步骤】
1.按30mg/kg体重静脉注射3%戊巴比妥钠麻醉动物,并将其仰卧固定在狗手术台上。切开颈部并进行气管插管。
2.于剑突下沿正中线切开腹壁10cm,暴露腹腔,拉出胃;双结扎肝胃韧带,中间剪断。将肝脏上翻找到胆囊及胆囊管,将胆囊管结扎;然后,用注射器抽取胆囊胆汁数毫升备用。
3.通过胆囊及胆囊管的位置找到胆总管,插入胆管插管,并同时将胆总管十二指肠端结扎(图3-19)。
图3-19 狗胰腺主导管及胆总管解剖位置
4.从十二指肠末端找出胰尾,沿胰尾向上将附着于十二指肠的胰腺组织用盐水纱布轻轻剥离,在尾部向上2~3cm处可找到一白色小管从胰腺穿入十二指肠,此为胰主导管。待认定胰主导管后,分离胰主导管并在下方穿线,于尽量靠近十二指肠处切开,插入胰管插管,并结扎固定。
5.做股静脉插管,备供输液与注射药物时之用;同时分别在十二指肠上端与空肠上端各穿一粗棉线,暂不结扎,备用。
6.分别把充满生理盐水的乳胶管接到胆管插管和胰管插管上;而后分别连接到生物信号采集系统上,以供记录滴数。
【观察项目】
1.观察胰液和胆汁的基础分泌。一般胆汁分泌持续不断,胰液分泌量少或无。
2.将事先穿放在十二指肠上端和空肠上端的两根粗棉线扎紧,而后向十二指肠腔内注入37℃的0.5%盐酸25~40ml,观察胰液和胆汁分泌有何变化(观察时间要长些)。
3.股静脉注射粗制促胰液素5~10ml,观察胰液和胆汁的分泌量。
4.股静脉注射胆囊胆汁1ml(胆囊胆汁稀释10倍),观察胰液和胆汁的变化。
【注意事项】
1.要注意结扎胆囊管,使胆汁的分泌量不受胆囊舒缩的影响。
2.剥离胰主导管时要小心谨慎,要求辨认准确,操作应当轻巧仔细。
【思考题】
1.向十二指肠腔内注入37℃的0.5%盐酸溶液,胰液和胆汁分泌有何变化?为什么?
2.股静脉注射粗制促胰液素后,胰液和胆汁的分泌有何变化?为什么?
3.股静脉注射胆囊胆汁,胰液和胆汁的分泌有何变化?为什么?
[注]促胰液素的粗制方法 在急性动物实验后刚死亡的动物身上,从十二指肠首端开始向下取约70cm小肠,将小肠冲洗干净,纵向剪开,且刀柄刮取全部黏膜放入研钵,加入0.5%盐酸10~15ml研磨后,将得到的稀浆倒入烧杯中,再加入0.5%盐酸100~150ml,煮沸10~15min。然后用10%~20%氢氧化钠趁热中和(用石蕊试纸检查);待至中性,用滤纸趁热过滤,即可得到粗制促胰液素,将其在低温下保存。
(伍庆华)
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