【摘要】：当造成DNA变性的条件除去后，两条分开的互补单链可以重新配对，恢复天然的双链螺旋构象，这一现象称为复性。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火。否则，将热变性的DNA迅速冷却至4 °C以下，DNA不可能发生复性。这一特性被用来保持DNA的变性状态。RNA印记、DNA印记、斑点印记以及新近发展的基因芯片等核酸检测手段都是利用了核酸分子杂交的原理。
当造成DNA变性的条件除去后，两条分开的互补单链可以重新配对，恢复天然的双链螺旋构象，这一现象称为复性。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火（annealing）。
DNA的复性受温度的影响，只有将温度缓慢下降才可使其重新配对复性。否则，将热变性的DNA迅速冷却至4 °C以下，DNA不可能发生复性。这一特性被用来保持DNA的变性状态。一般认为，比Tm低5～10 °C是DNA复性的最佳条件。
如果将不同种类的单链DNA或单链RNA放在同一溶液中，只要两种核酸单链分子之间存在着碱基互补关系，在适宜的条件（温度及离子强度）下，它们就可以形成杂化的双链（heteroduplex）。这种杂化双链可以在不同的单链DNA与单链DNA之间形成，也可以在单链DNA和单链RNA分子间或者单链RNA与单链RNA之间形成（图5-16）。这种现象称为核酸分子杂交（hybridization）。这一方法可以用来研究DNA分子中某一种基因的位置、鉴定两种核酸分子间的序列相似性、检测某些专一序列在待检样品中存在与否等。分子杂交在核酸研究中是一个重要工具。RNA印记、DNA印记、斑点印记以及新近发展的基因芯片等核酸检测手段都是利用了核酸分子杂交的原理。
图5-16 核酸分子的复性和杂交过程
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