【摘要】:加入57Co标记的维生素B12,与固定在微晶纤维颗粒上纯化的维生素B12结合物竞争结合,检测其放射活性,其量与维生素B12的含量呈反比,与标准管对照,换算出维生素B12的含量。血清维生素B12降低对巨幼红细胞性贫血诊断有重要价值;而白血病患者血清维生素B12含量明显增高;感染、真性红细胞增多症、某些恶性肿瘤和肝细胞损伤时维生素B12也可增加。
维生素B12参与体内DNA的合成,是DNA合成必需的辅酶,维生素B12缺乏或代谢紊乱时,DNA合成发生障碍,影响造血细胞在骨髓的增殖。
【测定方法】
1.放射免疫分析 使用抗氧化剂和氰化钾在碱性环境下(pH>12),将人血清中的维生素B12从载体蛋白中释放出来。加入57Co标记的维生素B12,与固定在微晶纤维颗粒上纯化的维生素B12结合物竞争结合,检测其放射活性,其量与维生素B12的含量呈反比,与标准管对照,换算出维生素B12的含量。
2.微粒子酶免疫分析 维生素B12抗体包被粒子,标本与其反应,洗涤后加入碱性磷酸酶标记的第二抗体,洗涤后加入4-甲基磷酸伞形酮,在碱性磷酸酶的作用下脱磷酸生成甲基伞形酮,被荧光照射后产生荧光,测定荧光强度的变化率即为维生素B12的含量。
【参考范围】
成人:148~660pmol/L
【临床应用价值】
血清维生素B12降低对巨幼红细胞性贫血诊断有重要价值;而白血病患者血清维生素B12含量明显增高;感染、真性红细胞增多症、某些恶性肿瘤和肝细胞损伤时维生素B12也可增加。
【影响因素】
1.标本避免溶血,脂血、黄疸对测定有影响。
2.标本放置于2~8℃可保存24h,-20℃可保存12个月。
3.口服维生素B12会使测定结果偏高,所以测定前一天应停药。
(许 慧)
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