血红蛋白电泳

各种血红蛋白的主要差异是组成珠蛋白的肽链不同，不同的肽链含有不同的氨基酸，具有不同的等电点。利用各种血红蛋白的等电点不同，在一定pH缓冲液中所带的电荷数不同，经电泳后，各血红蛋白的移动方向和速度不同，在特定的支持介质下（如：醋酸纤维膜、琼脂、淀粉凝胶和聚丙烯酰胺）可分出不同的血红蛋白区带，可用以观察有无异常血红蛋白区带和血红蛋白成分HbA2、HbF的变化。正常成人血红蛋白中，HbA占总蛋白浓度的98%，HbA2和HbF数量相对少些。珠蛋白肽链中某一氨基酸被其他氨基酸所取代会导致血红蛋白变异，即可出现血红蛋白病。目前可鉴定出600多种变异的血红蛋白，即结构变异的血红蛋白。在异常的血红蛋白中约有60%血红蛋白有电荷差异，可用电泳的方法对这些血红蛋白进行鉴定。

【测定方法】

琼脂糖凝胶电泳法（常用）：将洗涤过的血细胞加入溶血剂后混匀，将10μl溶血红细胞滴加在加样梳上，放置于琼脂糖凝胶条上走电泳，结束后将凝胶染色、脱色、干燥，扫描后判读结果。

【参考范围】

成人：HBA≥96．5%，HbF＜2．0%，1．5%≤HbA2≤3．5%

新生儿：HbF 60%～93%，HbA2＜1%

【临床应用价值】

1．α地中海贫血 出现Hb Bart（γ4）或HbH（β4），是由α链合成减少所致。

2．β地中海贫血 HbA2或HbF升高，HbA降低，是由于β链合成减少所致。

3．血红蛋白S病 出现血红蛋白S，该带位于A与A2带之间。

4．血红蛋白C病 出现血红蛋白C，与A2带重叠，当该带所占百分比高于15%时，应怀疑HbC，并应继续做酸性血红蛋白电泳或等电聚焦电泳加以确定。

5．血红蛋白E病 出现血红蛋白E，与A2重叠，当该带所占百分比高于15%时，应怀疑HbE，并应继续做酸性血红蛋白电泳与HbC进行区分，在酸性电泳中，HbE与HbA不能分开。

6．血红蛋白D病 出现血红蛋白D，与S重叠，需用酸性血红蛋白电泳进行区分，在酸性电泳中，HbD与HbA不能分开。

7．其他血红蛋白病 血红蛋白G病、血红蛋白K病等。

【影响因素】

1．标本应严格避免溶血，否则无法检测。

2．不能用枸橼酸盐或双草酸盐抗凝，以免增加离子强度，影响溶液的渗透压。

3．重度贫血患者红细胞太少的标本可用肝素抗凝，用等渗盐水洗涤后配成50%的红细胞悬液进行试验。

4．黄疸标本可影响结果观察。

5．电泳时尽量避免污染薄膜，手指也尽量触及膜的两端。

6．室温低时染色时间应延长。

（许　慧）