血清三酰甘油测定

三酰甘油又称中性脂肪或甘油三酯，是甘油中的3个羟基与3个长链脂肪酸形成的酯类。由于甘油骨架上分别结合了3分子脂肪酸、2分子脂肪酸或1分子脂肪酸，所以分别存在三酰甘油、二酰甘油和一酰甘油。血清中90%～95%是三酰甘油，其中结合的脂肪酸分别为油酸（44%）、棕榈酸（26%）、亚油酸（16%）和棕榈油酸（7%）。

三酰甘油溶解度低，因此在血浆中与载脂蛋白结合形成脂蛋白复合体进行运输。体内富含三酰甘油的脂蛋白主要是乳糜微粒（来源于饮食的外源性三酰甘油）和极低密度脂蛋白（内源性三酰甘油）。

三酰甘油测定用于对患有糖尿病、肾病、肝阻塞、脂代谢紊乱以及多种内分泌疾病的诊断及疗效的监测。

【测定方法】

三酰甘油测定的决定性方法为核素稀释-质谱法，参考方法为二氯甲烷抽提、变色酸显色法，常规方法为酶法（GPO-PAP）。作为临床常规测定，国内外均推荐GPO-PAP法。

用脂蛋白脂肪酶（LPL）使血清中的三酰甘油水解成甘油和脂肪酸，生成的甘油在甘油激酶（GK）和三磷酸腺苷（ATP）的作用下磷酸化生成3-磷酸甘油（G-3-P）。以磷酸甘油氧化酶（GPO）氧化3-磷酸甘油，然后以过氧化物酶（POD）、4-氨基安替比林（4-AAP）与4-氯酚（三者合称PAP）反应显色，测定所生成的H2O2。

目前国内外多数三酰甘油商品试剂根据上述原理测定。但这种方法测定的三酰甘油结果中包含了血清中的游离甘油，因此为了去除游离甘油对结果的影响，已经开发出两步法检测试剂，即在无脂蛋白脂肪酶存在时，游离甘油在甘油激酶和GPO的作用下生成H2O2，生成的H2O2在过氧化氢酶的作用下生成H2O和O2而被消耗。其余的反应同一步法，实际测定的是三酰甘油水解生成的甘油。

【参考范围】

正常人：≤1．70mmol／L。

美国国家胆固醇教育计划（NCEP）成人治疗导则推荐的医学决定水平为：＜1．7mmol／L是理想范围；1．7～2．25mmol／L为边缘增高；2．26～5．64mmol／L为增高；＞5．65mmol／L为很高。

我国《血脂异常防治建议》中提出的判断标准为：＜1．7mmol／L是理想范围；＞1．7mmol／L为升高。

【临床应用价值】

1．三酰甘油受生活条件和饮食方式、年龄、性别等因素的影响可有生理变动。如高脂肪饮食后三酰甘油升高，一般餐后2～4h达高峰，8h后基本恢复空腹水平；缺乏运动、肥胖也可使三酰甘油升高；成年后随年龄增长三酰甘油水平也逐渐升高；受性别影响，中青年男性的三酰甘油水平高于女性，而50岁后女性则高于男性。

2．三酰甘油是冠心病的独立危险因素，是动脉粥样硬化发生的重要因素之一。三酰甘油可使血液凝固增强，并抑制纤维蛋白溶解，促进血栓形成，故与冠心病的发生有密切关系，约80%的心肌梗死病人三酰甘油增高。

3．三酰甘油增高还可见于原发性高脂血症（多有遗传因素）、动脉硬化症、肥胖症、阻塞性黄疸、糖尿病、自身免疫性疾病、口服避孕药物、库欣病、严重贫血、肾病综合征、甲状腺功能减退及高脂饮食等。

4．大量饮酒后亦可使三酰甘油假性增高。

【影响因素】

1．受检者准备 抽血前2周应该保持平常的饮食习惯，禁食高脂肪食物；抽血前24h不饮酒，避免做剧烈运动；除降血脂药物治疗监测外，抽血前应停用影响血脂水平的药物（如降脂药、避孕药，某些降压药、激素等）；应空腹12h（可正常饮水）后取静脉血，由于三酰甘油的个体波动非常大，最好测2～3次（间隔1周）取平均值。

2．血液样本 因为体位能够影响水分在血管内外的分布而影响血脂水平，因此建议坐位采血；可以使用血清或血浆样本进行检测，但使用血浆样本进行检测时，可以使用肝素或EDTA作为抗凝剂，不可使用柠檬酸、草酸或氟化物，血清测定结果大约比血浆高3%。

3．样本稳定性 血浆或血清样本在4℃可保存5～7d，-20℃可稳定3个月。如样本长时间保存在室温，可发生自发水解，生成游离甘油，由于它来自三酰甘油，因此如果采用两步法测定，不应从三酰甘油的值中减去。

4．干扰因素 不同厂家的试剂抗干扰能力不同，通常情况下在血红素＞2g／L时会引起三酰甘油水平增高。胆红素＞342μmol／L（20mg／dl）和抗坏血酸＞30mg／dl时会引起三酰甘油过低，因为它们能和过氧化氢反应。

5．检测方法 目前国内外多数三酰甘油商品试剂采用一步法测定三酰甘油，即测定结果中包含了血清中游离甘油的量。在健康正常个体中，血清中的游离甘油大约为1．1mmol／L，由此引起的误差是可以忽略的。但有些标本中游离甘油的含量明显升高，如糖尿病、情绪应激、含甘油的药物、静脉营养等，此时计算来自三酰甘油的甘油含量时，应该减去游离甘油的量。

（程歆琦）