反应蛋白测定

C反应蛋白（C-reactive protein，CRP）是一种能在Ca2＋存在时与肺炎链球菌细胞壁C多糖发生反应的急性时相反应蛋白，具有激活补体、促进吞噬和免疫调理作用。CRP主要由肝脏产生，分子量为129 000。其含量的变化对炎症、组织损伤、恶性肿瘤等疾病的诊断及疗效观察有重要意义。CRP的主要生物学功能是通过与配体（凋亡与坏死的细胞，或入侵的细菌、真菌、寄生虫等的磷酰胆碱）结合，激活补体和单核吞噬细胞系统，将载有配体的病理物质或病原体清除。过去常用的检测方法有单向免疫扩散法、乳胶凝集法、火箭电泳法、酶联免疫吸附法。目前多采用速率散射比浊法。CRP低水平增高是心血管疾病的风险指标，为此发展了超敏C反应蛋白（high sensitivity C reactive protein，HS-CRP）测定的方法，利用微粒子增强的免疫速率散射比浊法，灵敏度可达0．2mg／L，用于预测动脉粥样硬化的危险性。

【测定方法】

1．酶联免疫吸附法（ELISA）。原理：采用双抗体夹心ELISA法。试剂中使用两种抗体与CRP分子上不同抗原决定族发生反应。即用抗人CRP单克隆抗体包被微孔板，加待测样本或标准品，再加入酶标记多克隆抗体（HRP-抗人-CRP），使特异性的形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。洗去未结合物后，加酶底物／色原呈色，呈色强度与检样中一定范围内的CRP浓度成正比。

2．免疫速率散射比浊法。用抗人C反应蛋白抗体和样品中C反应蛋白作用，形成抗原抗体复合物后可以使光散射增加。检测散射光变化速率峰值，可以反映样品中C反应蛋白含量。

3．微量投射比浊法，多为小型的POCT设备，操作简单方便，适合快速检查、急诊、诊所和基层医疗单位使用。某种型号的血细胞分析仪，在测定血常规同时，可对全血中CRP含量进行定量测定。

【参考范围】

婴儿出生后血中CRP浓度为0．02mg／L，新生儿脐血≤0．6mg／L；出生后2d增高到4mg／L，1周至1个月婴儿≤1．6mg／L，以后逐渐接近成人水平。

微量免疫比浊法（成人）：＜1mg／L

免疫比浊法（成人）：＜0．6mg／L

不同的检测系统（仪器和试剂）得出的结果有一定的差异，因此各实验室应该组建自己的参考范围。

【临床应用价值】

1．组织损伤，如大手术、严重创伤、烧伤、心肌梗死等，CRP常见于发病后数小时迅速升高，病变好转时迅速下降。若手术恢复后CRP又升高，提示继发感染或深静脉血栓形成。

2．各种细菌性感染，特别是G-杆菌感染，CRP常明显增高；而病毒性感染，CRP升高不明显或轻度增高，可作为细菌性感染和病毒性感染的鉴别诊断指标。

3．风湿热活动期CRP明显增高，可达200mg／L以上，而治疗好转后，CRP逐渐降至正常。

4．恶性肿瘤，器官移植后发生排斥反应，以及妊娠等都可以见CRP明显增高。

【影响因素】

1．药物因素影响：使用雌激素、口服避孕药可使CRP增高，应用皮质激素和抗炎药可使CRP下降。

2．标本因素：①免疫速率比浊法应使用新鲜血血清测定；如果8h内不及时测定，可将血清存放于2～8℃冰箱保存。但冰冻血清只能做一次复融，反复冻融会使测定结果下降。②微量法可使用血清、血浆或全血测定，可立即测定。③严重溶血或脂血的标本不能做测定。含类风湿因子和人抗鼠IgG抗体的标本都会干扰结果。

3．不同的厂家、不同批号的试剂不能混用。

4．使用酶联免疫吸附法时，试剂自冰箱取出后恢复至室温（18～25℃）使用。

（陈　静　张时民）