白细胞介素-2(IL-2)主要由活化的CD4阳性细胞产生,通过自分泌和旁分泌作用于分泌IL-2的细胞本身或邻近的CD4阳性或CD8阳性细胞,是机体免疫网络中最重要的调节因子。因此,IL-2活性的检测已经成为评价机体免疫功能的重要指标之一。但体液中IL-2含量甚少,难以直接测定,通常通过检测PHA和ConA等丝裂原诱导单个核细胞在体外产生IL-2的能力来反映。
【测定方法】
酶联免疫吸附法
原理:用兔抗人重组IL-2的抗体包被微孔板,标准品和样品的IL-2与抗体结合,加入生物素化的抗人IL-2抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的streptavidin与生物素结合,加入酶底物OPD,出现黄色,加终止液硫酸,颜色变深,在492nm处测定OD值,IL-2浓度与OD值成正比,可通过绘制校正曲线求出标本中IL-2浓度。
【参考范围】
以IL-2标准品的浓度(pg/ml)为横坐标,相应吸光度为纵坐标,制备标准曲线。待测血清所含IL-2浓度可根据所测吸光度从标准曲线得出。通常有酶联仪直接打印报告。参考值可参考试剂盒提供值。各实验室最好根据自身条件和方法,建立本实验室的参考值。
【临床应用价值】
1.IL-2增高可见于自身免疫性疾病,如SLE、类风湿关节炎;再生障碍性贫血、多发性骨髓瘤;移植排斥反应,如心脏移植后的急性排斥反应。
2.IL-2产生低下的疾病有系统性红斑狼疮、活动性类风湿关节炎、获得性免疫缺陷综合征(AIDS),持续性全身性淋巴瘤、胰岛素依赖型糖尿病、活动性内脏利什曼病、尖锐湿疣等。
3.IL-2的临床应用。目前重组IL-2已用于临床治疗肿瘤以及感染性疾病等。
(1)抗肿瘤:IL-2在体外可诱导PBMC或肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)成为淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)。LAK/IL-2对肾细胞癌、黑素瘤、非霍奇金淋巴瘤、结肠直肠癌有较明显疗效,对肝癌、卵巢癌、头颈部鳞癌、膀胱癌、肺癌等有不同程度的疗效。近年来已开始采用IL-2基因治疗对黑素瘤、肾细胞癌以及神经母细胞瘤等肿瘤等进行临床验证。
(2)感染性疾病:动物实验结果表明,IL-2对某些因细胞免疫功能低下而受病毒感染,需增强细胞免疫功能的病人有一定疗效。IL-2本身无直接抗病毒活性,它是通过增强CTL、NK活性以及诱导IFN-γ产生而介导抗病毒感染的。目前用IL-2治疗活动性肝炎已显示出可喜的苗头,对于单纯疱疹病毒感染、AIDS病(已进入Ⅱ期临床验证)、结节性麻风、结核杆菌感染等也有一定疗效。如rIL-2可明显延长结核杆菌H37RV株感染小鼠和豚鼠的半数死亡时间,降低死亡率,减少感染动物脾、肺组织内的结核杆菌数。
(3)免疫佐剂作用(adjuvanticity):应用IL-2作为佐剂与免疫原性弱的亚单位疫苗联合应用,可提高机体保护性免疫应答的水平。此外,最近发现IL-2具有降低血压作用,IL-2治疗高血压已进入Ⅰ期临床验证。
(4)国外采用IL-2白喉毒素融合蛋白治疗类风湿关节炎进入Ⅰ/Ⅱ期临床验证,约有74%患者病情得到改善,IL-2融合毒素主要作用于CD4阳性淋巴细胞,有较好的选择性。
【影响因素】
1.采用此法检测IL-2含量时,标准孔及待查样品均建议做复孔,每次测定应同时作校正曲线。
2.本法试剂盒应放置于-20℃冰箱保存。
3.用前于室温下平衡,溶液应轻轻摇匀后使用。
(陈 静)
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