大肠菌群的典型菌落状态图片

（一）临床细菌学检查

1．标本　肠道外感染根据感染部位可采集中段尿、脓汁、血液、脑脊液等；肠道感染则取新鲜粪便。

2．分离培养和鉴定

（1）肠道外感染：①除血液标本外，均需做涂片染色镜检。脓汁可直接涂片，尿液和其他液体先离心，再取沉淀物做涂片，革兰染色后镜检。②血液标本经肉汤增菌培养后，移种于血琼脂平板；体液标本的离心沉淀物和其他标本直接接种于血琼脂平板和肠道选择培养基。37℃孵育18～24h，观察菌落特征，挑取可疑大肠埃希菌菌落，进行系统生化反应鉴定。尿路感染尚需计数中段尿细菌总数，每毫升含菌量≥105才有诊断价值。

（2）肠内感染：粪便标本直接接种于选择培养基，挑取可疑菌落，进行生化反应鉴定，并用血清学试验分群定型，必要时用ELISA、核酸杂交、PCR等方法检测肠毒素和其他毒力因子。O157∶H7血清型还可用以下方法测定：①将标本接种于山梨醇麦康凯琼脂培养基培养后，挑取不发酵山梨醇的无色菌落，做血清学试验鉴定；②用酶联免疫吸附试验及磁性免疫分离法检查菌体抗原（O157）和鞭毛抗原（H7）。

（二）卫生细菌学检查

寄居于肠道中的大肠埃希菌不断随粪便排出体外，可污染周围环境、水源、食品等。样品中检出大肠埃希菌愈多，表明被粪便污染愈严重，间接提示可能有肠道致病菌存在。因此，常用细菌总数和大肠菌群数作为水、食品等的卫生细菌学检测指标。细菌总数指每毫升或每克样品中所含的细菌总数，大肠菌群数指每升样品中所含的大肠菌群数。大肠菌群指在37℃、24h内发酵乳糖产酸产气的革兰阴性无芽胞杆菌。我国卫生标准规定：每毫升饮用水、果汁、汽水中细菌总数不得超过100个；每升饮水中大肠菌群数不得超过3个；每100ml瓶装汽水、果汁中大肠菌群数不得超过5个。