抗人球蛋白测定

抗人球蛋白试验（antihumanglobulin test），又称Coombs试验，是检查红细胞不完全抗体的一种有效的试验诊断项目。本试验分为直接和间接两种。直接试验主要检查红细胞上是否有不完全抗体，间接试验是检查血清中有无游离的不完全抗体。

1945年，英国免疫学家Coombs等人发明了能检测红细胞表面抗体的一种新试验，故称之Coombs试验，亦即抗人球蛋白试验。这是诊断免疫溶血性贫血的主要方法。最早和现在常用的抗人球蛋白试剂是广谱抗血清，即抗IgG＋抗补体。国外研究发现，如采用特异的抗IgG、IgM或抗补体的试剂，红细胞表面的抗体是IgG和补体约占40%，单纯IgG占35%，单纯补体占10%，极少数病例是IgA或IgM。补体几乎都是C3b，即未激活的C3。

Coombs直接试验：将洗涤过的红细胞2%混悬液加入Coombs试剂，混合后离心1min促进凝集。如果肉眼或显微镜下能见到红细胞凝集，即为阳性，说明红细胞表面有不完全抗体或补体。阳性结果可见于自体免疫溶血性贫血、输血反应、某些药物或疾病引起的免疫溶血性贫血。

Coombs间接试验：先将受试的血清加入等量5%适当的正常红细胞（Rh阳性的O型红细胞），在37℃温育30～60min，以促使血清中的半抗体结合于红细胞上（致敏），将红细胞充分洗涤，以后实验过程同直接试验。如果红细胞发生凝集而正常对照（未经与受检血清温育的正常红细胞）不凝集，即为阳性，表明受试的血清中存在不完全抗体。

卡式凝胶方法是近来逐渐兴起的一项免疫检测新方法。该法是凝胶柱与盐水凝集法、聚凝胺法、酶法及抗人球蛋白实验检测法相结合的产物，1984年法国Dr．Yves Lapierre首先发明此方法，1988年瑞士达亚美公司将专利产品推向市场。全世界上千家医院使用该产品。

【检测原理】　卡式检测法的基本原理是生物化学凝胶过滤技术和免疫学抗原抗体反应相结合的产物，通过调节凝胶的浓度来控制凝胶间隙的大小。使其间隙只能允许游离的红细胞通过，从而使游离红细胞与聚集红细胞分离。如果通过离心红细胞沉积在凝胶管底部，则表明RBC未发生凝集，是阴性反应；若红细胞聚集在凝胶带上部，则表明红细胞发生凝集，呈阳性反应。

【适应证】

1．直接抗人球蛋白试验（DAT）　用于检测体内致敏的红细胞。可用于新生儿溶血病胎（婴）儿致敏红细胞检测，免疫性溶血性贫血的诊断，研究药物致敏的红细胞，输血反应的研究等。

2．间接抗人球蛋白试验（IAT）　用于检测体外致敏红细胞的抗体。可用于检出和鉴定意外抗体，交叉配血，不完全抗体检测红细胞抗原，新生儿溶血病母体抗体检测。