肝内蛋白质的代谢极为活跃,肝合成的蛋白质占人体每天合成的蛋白总量的40%以上。肝除合成自身所需蛋白质外,还合成多种分泌蛋白质,如血浆蛋白中,除γ-球蛋白外的白蛋白(Alb)、凝血酶原、纤维蛋白原、各种转运蛋白及血浆脂蛋白所含的多种载脂蛋白等均在肝合成。90%以上的血清蛋白和全部的血清清蛋白是由肝合成的,当肝功能受到损害时,这些蛋白质含量减少;肝病时肝内单核-巨噬细胞系统受到免疫刺激的作用,γ-蛋白生成增多,血清中含量增加。因此,测定血清中蛋白含量及各种蛋白质的比例,有助于了解肝合成蛋白质的功能,对肝病诊断和判断预后有意义。
血浆蛋白的主要功能为:①为细胞和组织提供新陈代谢所必需的蛋白质。②Alb维持血浆胶体渗透压,同时具有一定的缓冲酸碱的能力。③多种转运蛋白可转运类固醇、甲状腺激素、维生素A和维生素D、药物等物质;其中最重要的是Alb,许多非水溶性的物质,如胆红素、长链脂肪酸、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、药物等都与清蛋白结合后被运输的。④免疫球蛋白和补体参与免疫功能,抵抗微生物等外来物质入侵。⑤多种凝血与纤维蛋白溶解因子都是蛋白分子,它们共同作用,维持机体凝血和纤维蛋白溶解之间的动态平衡。⑥血浆蛋白是各种酶的重要组成部分,机体的新陈代谢的化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。⑦蛋白质在细胞膜的通透性、遗传信息的传递方面也起着决定性的作用。
血清总蛋白(total protein,TP)是血清清蛋白(albumin,Alb)与球蛋白(globulin,Glo)的总和。Alb是由肝实质细胞合成,在血浆中的半衰期为15~19d(平均为17d),是血浆含量最多的蛋白质,占血浆TP的40%~60%。由于Alb半衰期较长,且肝的代偿功能很强,若肝损害较轻,又在疾病的早期时,则Alb的检测结果不一定能显示蛋白质的量和质的改变。临床上一般只测定血清TP和Alb,从TP中减去Alb即为Glo的含量,Glo是多种蛋白质的混合物,其中包含较多的免疫球蛋白、补体、多种糖蛋白、金属结合蛋白、多种脂蛋白及酶类。Glo与机体免疫功能及血浆黏度密切相关。血清TP及Alb与Glo的比值(A/G)的变化可以反映肝蛋白质代谢的宏观水平。
【检测原理】 测试卡片有一套独特的系统可将血浆与血细胞分开。然后血浆流到测试盒的两侧并被输送到TP和Alb反应板。
(1)TP测定:采用双缩脲法。蛋白质分子中含有众多的肽键,在碱性溶液中,与二价的铜离子作用发生双缩脲反应形成紫红色的络合物,且显色强度在一定范围内与肽键数量,即与蛋白质含量成正比。
(2)Alb测定:①溴甲酚绿法。溴甲酚绿(BCG)在pH 4.2环境中,在表面活性剂存在时,可与Alb形成蓝绿色复合物,在波长630nm处具有最大吸收峰,并与样本中Alb浓度成正比。②溴甲酚紫法。溴甲酚紫(BCP)在酸性环境中,在表面活性剂存在时,可与Alb形成蓝色复合物,在波长550~600nm处具有最大吸收峰,并与样本中Alb浓度成正比。
【适应证】
1.各种急、慢性肝功能损伤,如慢性肝炎、亚急性重症肝炎、肝硬化、肝癌等。
2.其他可引起血清蛋白质异常的疾病,如肾病综合征、慢性肾病、大面积烧伤、甲状腺功能亢进、恶性肿瘤、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、恶性淋巴瘤、血吸虫病、疟疾等。
【标本采集】 新鲜指尖全血或肝素抗凝静脉全血,静脉血清或血浆。
【操作方法】
1.取待检标本(肝素抗凝指尖或静脉全血、血清和血浆)35~100μl(按不同厂家的测试要求),加入到检测卡中。
2.将测试卡进入检测仪器,输入检测项目,进行测定。
3.5~15min在仪器显示屏读取结果或输出打印结果。也可将检测结果直接上传医院信息系统或实验室信息系统。
【参考范围】
TP:60~80g/L;Alb:35~50g/L;Glo:20~30g/L;A/G:1.0~2.0∶1。
【临床意义】 血清TP降低与Alb减少相平行,TP升高常同时有Glo的升高。由于肝功能有极强的代偿能力及Alb半衰期较长,因此肝病变往往达到一定程度和一定病程后才出现血清TP和Alb量的改变,急性或局灶性肝损伤时,TP、Alb、Glo及A/G多为正常。因此,蛋白质检测用于评价慢性肝损害,并可反映肝实质细胞储备功能。
1.血清TP及Alb增高 主要由于血清水分减少,使单位容积TP浓度增加,而全身TP量并未增加,如急性失水、肾上腺皮质功能减退等。
2.血清TP及Alb降低 ①肝细胞损害影响TP与Alb合成:常见肝病有亚急性重症肝炎、慢性中度以上持续性肝炎、肝硬化、肝癌等。Alb减少常伴有γ-球蛋白增加,Alb含量与有功能的肝细胞数量成正比,Alb持续下降,提示肝细胞坏死进行性加重,预后不良;治疗后Alb上升,提示肝细胞再生,治疗有效。②低蛋白血症:临床上将TP<60g/L或Alb<25g/L称为低蛋白血症,临床上常出现严重水肿及胸腔积液、腹水。③营养不良:如蛋白质摄入不足或消化吸收不良。④蛋白丢失过多:如肾病综合征、蛋白丢失性肠炎、严重烧伤、急性大失血等。⑤消耗增加:见于慢性消耗性疾病如重症结核、甲状腺功能亢进及恶性肿瘤等。⑥血清水分增加:如水钠潴留或静脉补充过多的晶体溶液,较少见先天性低蛋白血症。
3.血清TP及Glo增高 当血清TP>80g/L或Glo>35g/L,称为高蛋白血症或高球蛋白血症。TP增高主要是Glo增高,其中以γ-球蛋白增高为主,常见原因有:①慢性肝病:包括自身免疫性慢性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、慢性酒精性肝病、原发性胆汁性肝硬化等。Glo增高程度与肝病严重程度相关。②M蛋白血症:如多发性骨髓瘤、淋巴瘤、原发性巨球蛋白血症等。③自身免疫性疾病:如系统性红斑狼疮、风湿热、类风湿关节炎等。④慢性炎症与慢性感染:如结核病、疟疾、黑热病、麻风病及慢性血吸虫病等。
4.血清Glo浓度降低 主要是合成减少,见于①生理性减少:小于3岁的婴幼儿。②免疫功能抑制:如长期应用肾上腺皮质激素或免疫抑制药。③先天性低γ-球蛋白血症。
5.A/G倒置 可以是Alb降低亦可因球蛋白增高引起,见于严重肝功能损伤及M蛋白血症,如慢性中度以上持续性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、多发性骨髓瘤,原发性巨球蛋白血症等。
【局限性】
1.测试标本采用非抗凝血时,必须使用新鲜血液,并在短时间内(1min)快速加入到测试卡中,以免血液凝固造成测定结果不准。不同厂家POCT检测仪对抗凝血的抗凝剂要求不同,在具体使用过程中,应严格按照仪器厂家要求留取抗凝静脉血。
2.血清TP及Alb含量与性别无关,但和年龄相关,新生儿及婴幼儿稍低,60岁以后约降低2g/L。另外,还有以下因素可影响测定结果:①剧烈运动后数小时内血清TP可增高4~8g/L;②卧位比直立位时TP浓度低3~5g/L;③溶血标本中每存在1g/L的血红蛋白可引起TP测定值约增加3%;④含脂类较多的乳糜血影响检测准确性,需进行预处理,以消除测定干扰。
【方法学优点】
1.操作简单,就指尖或静脉全血标本检测而言,不需离心分离血清或血浆;检测过程包括加样、运行检测、读取数据三个步骤,非专业检验人员经简单培训即可进行操作。
2.报告快捷(5~15min内可出结果),除测试片外无其他消耗品,仪器免保养,而且环保,无废液通道。
3.采用项目组合测试片,可同时对多项肝功能实验进行测定。
4.通常分析仪自带内外部的定标功能,使检测结果更加可靠。
5.检测仪器可与医院数据管理系统连接,快速进行众多的测试数据处理。
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