淀粉酶测定

淀粉酶（amylase，AMY）分子量为5．5～6．0kD，是体内重要的水解酶，以活性状态由胰腺排入消化道，催化淀粉及糖原水解。AMY分为α、β两类。人体中淀粉酶属于α淀粉酶，又称淀粉内切酶，不仅作用于淀粉的末端，还可随机地作用于淀粉分子内部的α-1，4-糖苷键，对分支上的α-1，6-糖苷键无作用，降解产物为葡萄糖、麦芽糖及含有α-1，6-糖苷键支链的糊精。AMY作用的最适pH为6．9～7．0，可通过肾小球滤过，是唯一能在正常时于尿中出现的血浆酶。

人体除胰腺、唾液腺外，其他一些组织如卵巢、输卵管、肺、睾丸、精液、乳腺等的提取物中也发现有AMY活性。血液中AMY主要来自胰腺和唾液腺，尿液中AMY则来自于血液。

【检测原理】　采用酶偶联法。测试卡片有一套独特的系统可将血浆与血细胞分开。然后血浆流到测试盒并被输送到AMY反应板。

AMY水解底物-对硝基苯麦芽庚糖苷（4NP-G7），生成寡糖及葡萄糖单位减少的对硝基苯麦芽庚糖苷（4NP-G2、4NP-G3、4NPG4），后者经预先加入的α葡萄糖苷酶水解生成黄色的对硝基苯酚和葡萄糖，连续监测405nm处对硝基苯酚吸光度的变化率，可以测出淀粉酶的活性。

【适应证】

1．原因不明的急性上腹部疼痛，急腹症的鉴别。

2．急性胰腺炎的诊断与疗效监测。

3．胰腺癌、胰腺外分泌功能障碍的辅助诊断。

4．胆道系统疾病。

5．怀疑流行性腮腺炎。

【标本采集】　新鲜指尖全血或肝素抗凝静脉抗凝全血，静脉血清或血浆。

【操作方法】

1．取待检标本（肝素抗凝指尖或静脉全血、血清和血浆）35～100μl（按不同厂家的测试要求），加入到检测卡中。

2．将测试卡进入检测仪器，输入检测项目，进行测定。

3．5～15min在仪器显示屏读取结果或输出打印结果。也可将检测结果直接上传医院信息系统或实验室信息系统。

【参考范围】　＜220U／L。

【临床意义】　血清或尿液AMY水平作为一种胰腺外分泌功能试验具有重要的临床意义。当胰腺或腮腺组织受损时，血清和尿液中的总AMY活性增高，但其他含AMY的组织，如肺、骨骼肌、子宫、睾丸、胆囊、胃等受损时也可使AMY活性增高，但不如胰腺或腮腺病变增高的幅度大。肾的排泄功能也可影响血清或尿液中AMY水平。血清中AMY半衰期很短，约2h，所以病变时血清淀粉酶增高早，但持续时间很短；尿液中AMY水平增加晚，但持续时间长。

1．AMY活性增高

（1）急性胰腺炎：发病后2～12h开始增高，12～72h达峰值，可达参考上限的4～6倍或更高，一般2～5d后恢复正常，若持续增高提示病变有反复或出现并发症。尿AMY　12～72h开始增高，下降缓慢于血清。因此急性胰腺炎的后期或恢复期测定尿液AMY更有价值。AMY活性升高的幅度虽然并不一定和胰腺的损伤程度相一致，但升高的程度越大，表示患胰腺炎可能性越大。坏死性的胰腺炎，原来升高的AMY可出现降低。

（2）慢性胰腺炎：血液AMY中度或轻度升高，尿液AMY可增高或变化不大。

（3）胰腺癌：早期即可增高，尤其是胰头癌。

（4）腮腺炎：血清AMY明显升高，如同时血脂肪酶不高，可与胰腺炎鉴别。

（5）急腹症：消化性溃疡穿孔、肠梗阻、胆石症、急性胆囊炎等都可出现AMY活性增高，这可能是因为胰腺受到侵犯或是富含AMY的肠液进入腹腔被吸收所致，或可能来自其他组织。

（6）服用镇痛药：如注射吗啡4h后AMY升高达高峰，并可持续24～48h，此时易对急性胰腺炎或急腹症患者诊断造成混乱。

（7）酒精中毒。

（8）肾功能不全：AMY经肾排出，肾功能不良时，由尿中排出AMY减少，而使AMY潴留。

（9）巨淀粉酶血症：AMY可与免疫球蛋白等形成复合物，或酶分子本身聚合成为巨淀粉酶分子，这种分子不能通过肾小球，血清中AMY升高，尿AMY不增高，可见于少数健康人及乙醇中毒、糖尿病、肝病、恶性肿瘤和自身免疫性疾病、获得性免疫缺陷综合征等。

2．AMY活性减低

（1）慢性胰腺炎：血AMY亦可降低，显著降低表示胰组织受到严重破坏，造成胰腺分泌功能缺损。

（2）胰腺癌：若癌组织引起梗阻时间过长，可导致腺体组织纤维化而引起AMY分泌减少。

（3）严重肾功能不全，排泄AMY障碍，尿液AMY可降低。

（4）巨淀粉酶血症时，尿液AMY降低。

【局限性】

1．测试标本采用非抗凝血时，必须使用新鲜血液，并在短时间内（1min）快速加入到测试卡中，以免血液凝固造成测定结果不准。不同厂家POCT检测仪对抗凝血的抗凝剂要求不同，在具体使用过程中，应严格按照仪器厂家要求留取抗凝静脉血。

2．年龄的影响。新生儿血清中AMY约为成年人的18%，5岁时达成人水平。

3．诊断胰腺炎的敏感度和特异性。目前国内对急性胰腺炎的实验诊断仍依赖于AMY测定，由于AMY血症除见于急性胰腺炎外，还可出现在许多胰外疾病中，使AMY的敏感度和特异性受限。有研究报告显示，AMY测定诊断胰腺炎的灵敏度为70%～95%，特异性仅为33%～34%。究其原因主要可能与每位患者的个体状况、发病时间、病情轻重程度和检测时间等不同有关。

4．AMY升高程度与病情轻重无关。病情轻者可能很高，病情严重者如暴发性胰腺炎因腺泡组织受到严重破坏，AMY生成大为减少，测定AMY不升高或升高不明显。重度急性胰腺炎的中、重度脏器功能衰竭，全身或局部并发症的产生和死亡率均与最初的AMY水平高低无关。血AMY轻度升高的患者同样可能存在或发展为重症胰腺炎，尤其在血AMY升高幅度较低的酒精性急性胰腺炎更是如此。

【方法学优点】

1．操作简单，就指尖或静脉全血标本检测而言，不需离心分离血清或血浆；检测过程包括加样、运行检测、读取数据三个步骤，非专业检验人员经简单培训即可进行操作。

2．报告快捷（5～15min内可出结果），除测试片外无其他消耗品，仪器免保养，而且环保，无废液通道。

3．采用项目组合测试片，可同时对多项肝功能试验进行测定。

4．通常分析仪自带内外部的定标功能，使检测结果更加可靠。

5．检测仪器可与医院数据管理系统连接，快速进行众多的测试数据处理。