多年来,便隐血试验均采用测定血红蛋白或其分解产物的方法,或用化学法,或用免疫学方法。化学方法在原理上无法避免产生假阳性和假阴性的现象,而且对于被检者的饮食要求很严格;而使用抗人血红蛋白抗体的免疫学方法,从灵敏度和特异性上都有所提高,并且不受饮食的影响,但也同样存在许多问题,如由于肠内细菌分解作用,导致血红蛋白抗原性降低,液体中的蛋白成分阻碍抗原抗体反应等,均会出现假阴性结果。
为了解决免疫学方法会出现假阴性结果的问题,研究者对血红蛋白以外的血液成分如转铁蛋白、结合血红素、纤维蛋白原进行了跟踪研究,结果发现转铁蛋白其抗菌能力强,稳定性好,经过粪便不易被破坏,与血红蛋白同时检测,便隐血假阴性的现象可以被大大降低。基于这一原理,20世纪90年代应用乳胶凝集法的转铁蛋白与血红蛋白同时检测的试剂被开发出来。
【检测原理】 检测板采用液相色谱的原理和免疫胶体金技术相结合而研制成的快速检测方法,对粪便中的转铁蛋白和血红蛋白同时进行检测。
【操作方法】 试验在15~30℃进行,滴下粪便悬液后20min时,目测测试板在测试区处出现的紫红色线。
【结果判读】
1.阳性 测试区R处出现紫红色线,T处出现一条或两条线时,表示有在检测灵敏度以上的血红蛋白或转铁蛋白,或二者同时存在,即隐血阳性。
2.阴性 仅在测试区R处出现一条线时,可判断为阴性。
3.复查 如在测试区R和T处均未出现检测线时,应考虑为试剂板的问题、加样不足或操作错误等原因,可再进行重复确认检查。
【方法学优点】
1.一步法操作,结果易判断。
2.不受检查前食物含有过氧化物酶样活性食物及抗坏血酸等影响。
3.特异性高,人以外的动物血红蛋白和转铁蛋白不发生反应,也极大限度地减少了肠道细菌引起的假阴性结果。
4.灵敏度高,人血红蛋白及转铁蛋白在50~800mg/ml范围内均呈阳性结果。
5.试验重复性好。
6.试剂稳定,只需室温保存。
【注意事项】
1.保证试剂板在有效期内,不要使用过期产品。
2.测试板在冷冻状态下并不反应,因此切勿冷藏保存。
3.务必保存在放有干燥剂的原装袋中,打开包装后应尽快使用。
4.标本要新鲜,女性需注意避免月经期经血的污染。
5.加入标本后20min判断结果,放置20min以上,有时出现检测灵敏度升高,或由于干燥原因难以判断结果。
6.本检测结果作为辅助诊断,还应结合临床症状进行综合判定。
【参考范围】 定性结果一般为阴性。
【临床意义】 临床上消化道病变如溃疡、癌肿、感染、钩虫、伤寒等做便隐血试验,在诊断上极为重要,特别是消化道溃疡有50%~70%、癌肿有87%的病例,便隐血呈阳性。消化道肿瘤只有做到早期发现、及时治疗才能达到理想效果,延长患者生存期。
(梁国威 徐 旭 冯京全 董 华)
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