糖化血红蛋白检测糖尿病准确吗

血中的己糖主要是葡萄糖，可与蛋白质发生缓慢的不可逆的非酶促反应，形成糖化蛋白。糖化作用可发生在血红蛋白、清蛋白、晶状体蛋白、基膜蛋白、胶原蛋白等，蛋白质的糖化可引起蛋白质的变性，激活巨噬细胞和内皮细胞发生反应，使低密度脂蛋白的清除受损，增加血小板的黏附性，促使糖尿病各种并发症的发生，糖尿病并发症主要表现在大小血管病变，以眼、心、脑、肾诸器官受累最严重，并可发生心、肾功能不全和神经系统功能障碍。糖化蛋白的浓度与糖尿病合并的血管病变呈正相关，近年来糖化血红蛋白正日益受到临床的高度重视。血糖易受饮食、活动、药物影响而经常波动，因此随机血糖只能反映取血瞬间的血糖水平，不能反映一段时间内的血糖情况。而糖化血红蛋白（glycosy-lated hemoglobin，GHb）可以作为糖尿病控制与否的监测指标，与血糖测定配合检测，能够更好地评价病人的糖代谢状况，同时可用此指标估计血管并发症发生的危险度。

糖化血红蛋白是红细胞血红蛋白的某些特殊分子部位和己糖（特别是葡萄糖）经过缓慢、连续而不可逆的非酶促反应结合而形成的产物，糖化血红蛋白合成的速率与血糖的浓度成正比。成人红细胞的血红蛋白包括HbA1（占90%以上）、HbA2（占2．5%左右）和HbF（占1．5%左右）。HbA1中的部分血红蛋白与己糖结合生成HbA1A（与磷酰葡萄糖结合）、HbA1B（与果糖结合）和HbA1C（与葡萄糖结合）。HbA1C就是通常所说的糖化血红蛋白（GHb）。糖化血红蛋白指的是和葡萄糖结合的血红蛋白占全部血红蛋白的比例。故HbA1C的测定最为准确，如果测定的是全部HbA1，则其结果将比HbA1C测定高2%～4%，正常人一般为4%～6%。当血液中葡萄糖浓度较高时，人体所形成的糖化血红蛋白含量也会相对较高。人体内红细胞的寿命一般为120d，半衰期为60d，因此HbA1C的测定可反映检测前6～10周的平均血糖水平，而与抽血时间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关。

糖化血红蛋白的测定方法主要有两类，一是基于糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白所带的电荷不同将二者分开，有阳离子交换层析法、电泳法和等电聚焦电泳法；二是基于血红蛋白上糖化基团的结构特点，有亲和层析法和单克隆抗体免疫法，使用不同的方法检测，参考范围也存在一定的差异。快速糖化血红蛋白检测仪是真正的POCT全定量检测仪器，一般采用先进的亲和层析技术、免疫荧光技术、干式免疫层析或微粒色谱法等，仪器小巧、轻便、移动方便，操作简单，仅需数微升末梢血或静脉血，数分钟即可出结果，检测结果多以检测出的HbAlc百分比形式显示。并具有质量控制系统。此类仪器大多为一机多用，可同时进行CRP、HbAlc、U-Albumin、D-Dimer等多项检测。检测线性范围宽，检测CV一般＜5%。适用于各级医院的检验科、内分泌科、小儿科、肾病科、心内科、神经内科等科室。

【检测原理】　以2种检测方法为例。

1．亲和层析法　采用硼化琼脂糖为载体，利用其与糖化血红蛋白残基中的葡萄糖特异结合的特性，达到分离糖化血红蛋白的目的。

2．免疫凝集法　以Bayer DCA2000＋糖化血红蛋白分析仪为例。①总血红蛋白的检测：总血红蛋白被铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白，之后与硫氰酸盐形成硫氢酸高铁血红蛋白。最后用比色法（531nm）检测出样本中的总血红蛋白浓度。②糖化血红蛋白检测：胶珠免疫抑制法。人工合成的凝聚剂（含多克隆的糖化血红蛋白免疫活性结构）引起胶珠（含糖化血红蛋白鼠单克隆抗体）的凝集，其凝集物增强了531nm处的光散射。通过531nm的吸光度值确定光散射程度，从而确定糖化血红蛋白的标准曲线以测定其浓度。经分析仪自动进行测量和计算，最后以糖化血红蛋白百分比浓度的形式显示结果。

【适应证】

1．主要用于监测糖尿病治疗过程中血糖控制水平，以便调整用药，也可估计新诊断的糖尿病患者已有高血糖的时间。

2．适用于各级医院不同科室及门急诊的快速检测。

【标本采集】　任何时间采集抗凝或非抗凝静脉血或末梢血数微升。

【操作方法】　以Bayer DCA2000＋糖化血红蛋白分析仪为例，其他各厂家仪器按仪器说明操作。

1．通过毛细管采样器上的玻璃毛细管采集1μl全血（末梢血或静脉血），并插入试剂盒。加有EDTA、肝素、柠檬酸盐、氟化钠或草酸盐的全血样本可在-70℃至5℃保存2周，或在25℃以下保存1周。

2．扫描试剂盒上条形码，并插入测定仪。

3．拔掉尾部、关上门，6min后即可读取结果。

【参考范围】　HbAlc：4．5%～6．3%，由于试验方法不同参考范围有一定差异。国际卫生组织（WHO）建议HbAlc的正常参考值为＜6．5%；临界值为6．5%～7．5%；病理状态时≥7．5%。糖尿病患者HbAlc≤7．0%时，说明血糖水平控制较好。

【临床意义】　HbAlc的合成速率与红细胞所处环境中糖的浓度成正比，HbAlc的浓度和该时间内的平均浓度有关，不受每天葡萄糖水平变化的影响，也不受运动和饮食等因素的影响。HbAlc所占比率反映测定前2～3个月内平均血红蛋白水平，糖化血红蛋白水平与红细胞寿命及数量有关，HbAlc不能单独用于糖尿病的诊断，但可反映糖尿病长期的控制状况与程度。HbAlc检测是实验室监测糖尿病长期控制状况的可靠指标。HbAlc检测主要用于以下情况。

（1）糖尿病患者治疗效果的监测，当控制不佳时，糖化血红蛋白水平可高于参考范围2倍以上，根据监控结果临床医师可调整治疗方案。

（2）HbAlc测定可作为研究糖尿病血管并发症与血糖控制关系的指标，严格控制血糖水平可使视神经病变、神经病变、心血管病变和肾病变明显降低。HbAlc长期控制不佳易发生糖尿病血管并发症。

（3）评估血糖每天都有明显波动的糖尿病患者，在1983-1993年在美国和加拿大的20所医学中心通过对1　441例1型糖尿病病人进行的糖尿病干预和并发症的临床研究（diabetes control and complication，DCCT）的基础上，美国糖尿病协会（ADA）提出了糖尿病治疗的建议，应将糖化血红蛋白水平控制在7%之内。糖尿病控制较好时可2～3个月测定一次，控制较差的患者应增加监测频率。

（4）用于糖尿病患者的不同治疗方法疗效的评估。

【评价及注意点】

1．由于HbAlc和HbF无论用电泳法或层析法都不易分开，因此HbF增高或有血红蛋白病（HbS、HbC、HbD）时不宜用层析法，改用单克隆抗体法较好。

2．因为糖化血红蛋白水平是由平均血糖浓度和红细胞寿命两种因素决定的，所以血红蛋白病可以影响检测结果，因在患此类疾病时，血红蛋白A可发生很大变化。当红细胞寿命延长时，检测结果可出现假性升高，在出现溶血或失血时，可使检测结果降低。

3．一般情况下，糖化血红蛋白检测可提供总血红蛋白在7～24g／dl范围内的精确结果，大部分患者的糖化血红蛋白浓度都在此范围内，但在病理情况下，会出现＜7g／dl或＞24g／dl，此种情况时可尝试用其他方法检测。

4．糖化血红蛋白测定时，血液中可能存在的异常血红蛋白对某些测定方法可产生干扰，按异常血红蛋白的种类不同，可使糖化血红蛋白产生假性的异常升高或降低。但亲和层析法由于特异性强，不受异常血红蛋白的干扰。

5．应注意试剂盒储存的温度、湿度要求及使用的有效期限。

6．要使用仪器厂家专门提供的质控品，以确保化验试剂的有效和操作正确。

7．糖化血红蛋白测定的标准化。美国国家糖化血红蛋白标准计划（NGSP）于1996年形成，由执行委员会和参考实验室网络组成，其中实验室网络包括管理核心、中心参考实验室、参考实验室和二级参考实验室。所有参加NGSP活动实验室测定结果的室间变异系数（CV）＜5%。HbAlc检测结果与靶值的偏差＜0．8%，目前美国绝大多数实验室报告的结果都能溯源到美国糖尿病控制及并发症（DCCT）结果。其中90%的实验室以HbAlc报告糖化血红蛋白的结果。使对糖尿病及其并发症的治疗和预防工作有了统一的参考标准。目前，美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）采纳了NGSP的标准化模式。此类检测仪中糖化血红蛋白测定的标准化多数是按照美国DCCT和欧洲糖化血红蛋白参考实验室所推荐的标准执行，可溯源到NGSP。如英国DREWSCIENTIFIC公司的DS1糖化血红蛋白分析仪；挪威的NycoCaed ReaderⅡ；Bayer DCA2000＋糖化血红蛋白分析仪等。

8．加抗凝剂或不加抗凝剂的毛细管血和静脉血均可应用。抗凝剂可采用EDTA、肝素、柠檬酸盐、氟化钠或草酸盐等。