前列腺抗原测定

据统计，前列腺癌的发病率在世界范围内呈上升趋势。在美国约占男性肿瘤的36%，以及占男性肿瘤相关死亡率的13%。在欧美国家前列腺癌是发病率最高的恶性肿瘤，死亡率仅次于肺癌，位于男性肿瘤的第二位。在我国前列腺癌的发病率和死亡率也在迅速增长。1992年，我国前列腺发病率约为3．4／10万男性人口，前列腺癌的早期诊断是决定能否进行根治性治疗的关键。

前列腺特异性抗原（prostate specific antigen，PSA），由前列腺上皮细胞合成分泌至精液中，是精浆的主要成分之一。PSA是一种由hKLK3基因编码由前列腺上皮细胞分泌的单链糖蛋白，分子质量约为34kD。1979年从前列腺组织中提取并纯化了这种蛋白质，被命名为前列腺特异性抗原，正常前列腺及病变前列腺组织内均含有PSA。PSA在血清中主要有两种存在形式：一种是游离型的PSA（F-PSA），约占血清PSA总浓度的10%～30%；另一种是与α1-抗糜蛋白酶（ACT）结合的PSA（PSA-ACT），约占血清PSA总浓度的70%～90%。由于其具有糜蛋白酶活性，在正常情况下，PSA主要被分泌到前列腺液中，能够水解精液凝固蛋白Ⅰ和Ⅱ，使精液液化。在精液中PSA含量较高，在正常男性血清中仅可检测到微量的PSA，在精液中其浓度大约是血清中浓度的100万倍。

前列腺腺泡内容物富含的大量PSA与淋巴系统之间由内皮层、基底细胞层和基底膜构成的屏障相隔，正常情况下只有少量PSA释放入血，又因PSA与血中α1-抗糜蛋白酶和α2-巨球蛋白结合而失活，血液中通常不含或只有极微量PSA。当肿瘤、挤压或其他病变破坏这道屏障时，腺泡内容物即可进入淋巴系统，并随之进入血液循环，从而导致外周血PSA水平升高，因此挤压或破坏前列腺细胞的疾病均可造成PSA的增高，包括前列腺癌、前列腺良性增生等。另外直肠指检等检查也能引起PSA的增高。

PSA是前列腺癌的特异性标志物，也是目前少数器官特异性肿瘤标志物之一。前列腺癌的诊断特异性达90%～97%。最近研究表明，在前列腺癌中游离PSA／总PSA（f-PSA／t-PSA）比正常情况下要低，一般认为F／T（f-PSA／t-PSA）临界值为0．20，在0．20以下需考虑是否为前列腺癌的问题。

PSA检测方法主要包括酶免法、化学发光免疫分析、微粒子酶免疫分析、电化学发光免疫分析。其中酶免法检测需手工操作，比较费时，操作起来比较复杂；而后三种检测方法则需要大型的检测设备，只适合在有一定规模的实验室内进行操作。下面介绍的方法能够快速、简便、准确地检测出PSA的浓度。

【检测原理】　PSA半定量检测试剂盒采用双抗体夹心法，测试区（T）、参考线（R，位于中间）和控制线（C）上均标有不同的抗体，样品端的反应垫上吸附有相应的抗体及蛋白胶质颗粒。标本滴入试剂盒加样（S）孔内后依毛细效应向上层析。如果标本中的PSA水平接近或高于4ng／ml，则测试区内（T）将有紫色条带出现，结果呈阳性。否则测试区内（T）将不出现条带，结果呈阴性。同时，在参考线区（R）会出现一条紫色条带，作为10ng／ml的参考线。此外，不论结果如何，质控区（C）内都会出现一条紫色条带。其作用在于判断检测过程是否有足够标本、层析过程是否正常的标准，同时也是试剂的内控标准。

【适应证】

1．前列腺癌的诊断。

2．高危人群前列腺癌的筛选与早期诊断。

3．前列腺癌患者治疗效果和病程监测。

【标本采集】　全血、血清、血浆。

【操作方法】

1．将试剂盒置于干净平坦的台面上，在加样孔（S）中滴加约40μl标本。等标本渗入样品孔中后，加入1滴缓冲液。

2．在5min时读取测试结果，10min后判读无效。

【结果判读】

1．阳性　可见三条紫色条带。分别位于测试区（T）、参考区（R）和质控区（C）内。

（1）PSA水平在4～10ng／ml：测试区（T）有条带，但条带强度弱于参考线。

（2）PSA水平在10ng／ml左右：测试区（T）有条带，条带强度接近参考线。

（3）PSA水平高于10ng／ml：测试区（T）有条带，条带强度强于参考线。

2．阴性　参考区（R）和质控区（C）各出现一条紫色条带，但在测试区（T）内无条带出现。表明标本中PSA水平低于4ng／ml。

【参考范围】　阴性。

【临床意义】

1．良性疾病　在前列腺炎和前列腺梗死的患者中可见血清PSA浓度升高。一些良性增生时也可检测到血清PSA的升高，其升高的程度取决于年龄和疾病的程度。

2．高危人群前列腺癌的筛选与早期诊断　PSA联合直肠指检可提高前列腺癌的检出率，且联合监测所发现的肿瘤常局限于器官内，预后较好。若PSA和直肠指检均异常，则前列腺癌的阳性预示值达50%。定期进行PSA筛检，能够查出约27%处于进展期的前列腺肿瘤患者。

3．前列腺癌的分期与肿瘤体积大小的评价　血中PSA的水平与肿瘤体积有关，70%术前PSA水平＜2μg／L的患者疾病仍局限于器官内，异常高的PSA水平提示前列腺癌的范围不再局限于前列腺内。而82%的PSA水平＞50μg／L的患者显示绝对手术指征或有骨淋巴结转移。

4．前列腺癌疗效预后判断　对于治疗前PSA水平＞20μg／L的患者，提示前列腺全切除术可能无效。放疗前血清PSA水平与治疗成功的可能性呈正相关。经有效的前列腺根除术后，PSA的水平应在3～6个月降至正常。若浓度仍升高则预示仍残留有前列腺癌组织。当远处肿瘤复发时，从PSA开始升高至出现肿瘤复发的其他临床迹象的平均间隔时间为5．5个月，而局部肿瘤复发时的平均间隔时间为14个月。PSA持续升高主要见于骨转移的病例。

【局限性】

1．PSA不能单独用于前列腺癌的诊断与分期。PSA在前列腺良性增生（BPH）时阳性率可达30%～45%甚至以上；约20%的急性前列腺炎和约3%的慢性前列腺炎患者PSA升高；故需要与游离PSA、直肠指检、直肠超声检查、前列腺活检等方法联合应用，经综合分析后作出诊断。

2．病人在接受激素治疗会影响PSA表达水平。正常的前列腺活检和直肠指检（DRE）检测也会增强体内的PSA水平，由于DRE会造成前列腺管上皮细胞挤压或破坏，引起PSA增高，从而造成PSA检测假阳性。因此进行PSA检测时，必须在直肠指检前抽取血液样本。如果已经行DRE检查，则需等1周后再检测PSA。

3．本试验仅对病人体内总PSA的水平进行半定量检测，而不能作为诊断前列腺癌的指标。检测结果必须结合其他临床症状，由医生进行诊断。少于1%的正常人和前列腺炎、梗死、良性前列腺增生病人体内PSA水平会高于正常值。

4．阴性结果并不能排除体内PSA的增高。如果测试结果呈阴性并有临床症状存在，可建议使用其他临床方法进行测试。

【方法学优点】　PSA半定量金标检测试剂盒在临床标本中与检测PSA的酶免试剂盒进行比较，其相对一致达98%。