乳头溢液中的癌胚抗原的检测

乳头溢液，一般是指非妊娠哺乳期的乳腺导管分泌液，多属病理性，是乳腺疾病比较常见的症状。此症常为良性病变，但常有恶变的可能。特别是不伴有肿块的血性溢液中，癌可占6%～18%。因此，有关溢液的定性，特别是不伴有乳腺肿块时，乳头溢液癌胚抗原（CEA）检测常能协助诊断。

CEA是位于细胞表面的糖蛋白。已证明是乳腺癌的一种很有用的标志物。它与肿瘤的远距离转移和复发有关。贾国丛等检测乳头溢液，发现CEA高值病例中，癌前病变及早期乳腺癌的检出率明显增高。病变组织中的CEA值增高，则乳头溢液中的CEA值也相应增高。乳头溢液中CEA值的水平与该组织中CEA的表达有高度相关性。

李树玲等行乳腺导管液检测对乳腺癌进行早期诊断，通过对951例乳腺癌患者的乳腺导管液进行采集，特别是对无乳头溢液的患者进行乳腺导管插管、冲洗，采取对冲洗液用放射免疫方法，检测乳腺导管液中癌胚抗原（CEA）的含量，进行乳腺癌的早期诊断。检测结果表明CEA敏感性及特异性均较高。且乳腺肿瘤组织中的CEA，在良性肿瘤及癌的阳性着色率分别为19.23%及81.5%，两者有显著性差异。表明乳头溢液中CEA检测可作为乳腺癌早期诊断的有效方法。

（一）标本采集

将乳头溢液0.5ml收集于密封试管内-20℃保存备用。如无乳头溢液患者可在乳头表面选择与病变或可疑病变相应方位的两个导管开口，行导管插管。用1ml注射器注入0.9%生理盐水，并立即吸取反复冲洗10余次，最后回收液量约为0.5ml,将冲洗液置于密封试管内-20℃保存备用。

（二）检测

CEA肿瘤标志物检测采用放射免疫分析法进行测定。药盒由北京同位素公司北方免疫试剂研究所提供。将标本室温下冻融除血清外标本离心（3000r/min）5min，取上清液，按规定进行加样操作，样品量100μl，灵敏度<2ng/ml，血清CEA正常值范围0～15ng/ml，阳性阈值为20ng/ml，或采用免疫组化PAP法进行测定，根据免疫组化染色后病理细胞的着色程度，可分为四级：强阳性（+++）胞质呈深棕色；阳性（++）胞质呈棕黄色；弱阳性（+）胞质呈浅黄色；阴性（-）胞质不着色。同时记录各级所占病变范围的百分数，取其较高级者定为病变CEA的阳性程度。

附:乳头溢液中癌胚抗原的快速检测及应用

乳头溢液中癌胚抗原含量的检测对于诊断乳腺疾病的性质、早期发现乳腺癌，具有重要的参考价值。传统的免疫组化或放射免疫法测定操作时间长，检测需样本大，且对检测试剂、检测仪器的要求较高。天津肿瘤医院郎荣刚等（2004年）应用简便快捷的免疫色谱分析法检测乳头溢液中CEA含量。

1.检测试剂 CEA检测试剂盒由日本化药研究所提供，试剂盒包括检测板、展开液、定量吸管、标准比色板等。

2.检测方法

（1）用定性吸管直接吸取溢液5μl，滴加到检测板加样点，至溢液完全被吸收。

（2）在5min内将展开液滴加到展开液加样点。

（3）静置5min将检测板的显色与标准比色板对照。

（4）目测置色与标准比色板对照，行半定量得出结果。

3.结果判断 CEA检测结果，<100ng/ml为阴性（-），100～400ng/ml为可疑阳性（±），400～1 000ng/ml为阳性（+），> 1000ng/ml为强阳性（++）。阳性提示上皮细胞增生活跃，强阳性提示高度可疑为癌。

4.优点 本法所需样本量少，只需5μl，无创伤。检测速度快，只需15min，操作简便，无需接触放射性物质，结果准确。是早期发现和早期诊断乳腺癌的一种简便实用的方法。