临床研究内容

早20世纪的80年代，刘友章等通过电镜观察发现脾虚胃脘痛患者胃黏膜壁细胞线粒体数目减少，线粒体肿胀，基质变浅，嵴断裂，膜缺损等超微结构受损，并且线粒体质和量的改变和脾虚症状及病情变化密切相关。提出脾与线粒体具有相关性，更进一步提出中医脾主运化，不仅仅是指食物在胃肠的消化吸收，更重要的是生物氧化产能过程。为了进一步证实该理论，刘友章教授带领研究生在随后的二十余年里开展了系列临床研究。从1984年起至1991年止，研究团队连续6年对慢性胃炎、胃十二指肠球部溃疡、慢性结肠炎等疾病属于脾虚型的病人，分为胃脘痛组、慢性腹泻组及慢性胃炎组进行了胃肠黏膜细胞线粒体数量及其超微结构的研究，发现胃脘痛组脾虚病人胃黏膜壁细胞线粒体均数减少，与正常组及肝胃不和组比较，差异有高度显著性（P＜0.01），肝胃不和组线粒体均数与正常组比较，差异无显著性（P＞0.05）；胃黏膜壁细胞、浆细胞线粒体超微结构受损，表现为线粒体肿胀、膜缺损、嵴断裂、基质变淡，浆细胞内质网扩张。慢性腹泻组脾虚组病人单位面积内柱状细胞线粒体均数比对照组少，差异有高度显著性（P＜0.01）。慢性浅表性胃炎组脾虚病人治疗前壁细胞及主细胞线粒体的体密度比对照组减少。脾虚病人患者主细胞线粒体固缩，壁细胞内部分线粒体肿胀、嵴断裂。刘友章教授并于1986年“全国中医理论现代研究讨论会”上首先报道了脾虚胃脘痛病人壁细胞线粒体数目减少、超微结构受损。从90年代起，根据“脾主肌肉”理论对许多神经肌肉疾病如重症肌无力、肌萎缩侧索硬化、进行性肌营养不良、多发性肌炎等用健脾益气为主治疗，取得较好的临床疗效。为了探讨痿病的病理学基础和健脾益气方药治疗痿病的作用机制，研究团队对16例“痿证”患者（6例重症肌无力、4例ALS、4例进行性肌营养不良、2例多发性肌炎，辨证为脾虚12例，肝肾亏虚4例）肌肉活检组织应用透射电镜观察骨骼肌超微结构，重点对细胞线粒体的结构进行了观察，发现正常人组肌细胞肌节排列整齐，线粒体丰富，形态正常，分布于肌节周围；脾虚型肌萎缩侧索硬化病人肌纤维轻度受损，线粒体固缩，嵴、膜不清；脾虚型肌营养不良病人可见肌纤维严重受损，线粒体固缩，嵴、膜不清，超微结构受损；脾虚型重症肌无力病人肌细胞肌节清楚，线粒体数目减少，部分肌节间缺乏线粒体，可见线粒体空泡化。2003年至2005年，研究团队通过观察健中愈疡片对胃溃疡线粒体DNA修复酶调控机制的临床研究发现，正常组胃黏膜8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量最低，而胃溃疡组8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量很高，与正常组相比具有极显著差异（P＜0.01）；胃舒平组8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量与胃溃疡组没有明显差异（P＞0.05）；法莫替丁组8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量较胃溃疡组极显著降低（P＜0.01），但仍极显著地高于正常组（P＜0.01）；健中愈疡片组8-氧鸟嘌呤DNA糖基化酶和胸腺嘧啶乙二醇DNA糖基化酶含量最高，与其他四组均有极显著差异（P＜0.01）。研究表明在作用机制上健中愈疡片提高了线粒体DNA修复酶对受损胃黏膜的自我修复机制，促进了溃疡的自我愈合，这是和西药作用机制不同的方面，西药治疗侧重于对有害因素的消除和抵御，而健中愈疡片侧重于自身的修复，即符合中医理论中“扶正驱邪”、“正气存内，邪不可干”的观点。

劳绍贤等应用透视胃镜发现胃脘痛脾虚型患者、慢性结肠炎患者和慢性胃炎脾虚型患者消化道黏膜主、壁、柱状细胞会出现线粒体数目明显减少，线粒体结构损伤，慢性胃炎脾虚型患者线粒体的体密度、数密度用健脾方药治疗后可以回升。由此认为，线粒体的变化就是脾虚证异病同证的基础，恢复线粒体正常功能应该就是治疗脾虚证的本。邓伟民等应用细胞形态立体计量学对脾虚患者胃黏膜主、壁细胞线粒体进行研究，发现脾虚患者胃黏膜主、壁细胞治疗前与正常人相比体密度减少，经健脾治疗后，线粒体数目增加，恢复正常人水平，进一步说明脾虚证候的产生和改善可以从线粒体数目反映出来。程学仁等应用细胞形态立体计量学的方法，对脾虚证患者十二指肠吸收细胞的线粒体进行研究。结果表明：脾虚组线粒体的体密度、面密度、数密度减少，但未见线粒体肿胀或固缩现象。尹耀光等研究显示：脾虚证胃黏膜亚微结构发生变化，线粒体退变，线粒体内Zn、Cu和DNA含量下降是脾虚证的共性。尹耀光等还观察了胃康复冲剂（健脾药为主）对胃黏膜上皮细胞核，线粒体Zn、Cu和DNA含量的影响，结果显示4组脾虚证（脾气虚证，脾阳虚证，脾阴虚证，脾虚气滞证）胃黏膜细胞线粒体Zn、Cu水平较健康对照组低（P＜0.05～0.01）。提示该药是通过改善胃黏膜上皮细胞核与线粒体Zn、Cu和DNA含量和体内其他生物活性物质的水平，以维护机体内环境适应性调节机制实现的。