实验研究内容

1. 脾虚型动物模型多脏器的线粒体变化 于向民等用电镜细胞化学方法观察多柔比星（ADM）对大鼠肝细胞的毒性及中药六君子汤的保护作用，结果显示：ADM可使肝细胞中线粒体肿胀，线粒体内细胞色素C氧化酶活性降低，个别线粒体酶反映产物消失，而预先投入六君子汤再给予ADM则其酶活性及分布与正常对照组无明显差异，这表明六君子汤可防止ADM引起的细胞色素C氧化酶降低，预防ADM引起的膜脂质过氧化，从而对肝细胞起保护作用。刘友章等用耗气破气加饥饱失常方法，塑造大鼠长期脾虚模型，并观察大鼠肝、心肌、胃黏膜及骨骼肌细胞线粒体数量和超微结构的变化及健脾药物四君子汤的影响，研究表明：脾虚模型大鼠肝、心肌、胃黏膜及骨骼肌细胞线粒体含量明显减少，线粒体形态异常（肿胀，缩小），结构紊乱（嵴断裂，嵴突消失，膜破裂），基质改变（变淡），或成空泡样变。健脾药物四君子汤具有提高细胞线粒体数量，修复线粒体损伤的作用。刘友章也观察了四君子汤对脾虚大鼠线粒体细胞色素氧化酶的影响。结果表明：脾虚大鼠存在mtDNA编码CoX亚基损伤，细胞色素和细胞色素氧化酶降低。四君子汤具有修复脾虚所致的mtDNA编码CoX亚基损伤，提高细胞色素cyta，cytb，cytc，cytc1含量和细胞色素氧化酶的作用。刘健等用过劳和饮食失节法塑造大鼠脾气虚模型，观察随着时间的延长，其肝细胞、心肌细胞和空肠细胞的线粒体肿胀，嵴断裂，基质变浅及排列紊乱等逐渐加重，提示脾气虚大鼠肝细胞、心肌细胞和空肠细胞的线粒体的变化是一个由轻到重的渐进过程。杨维益等，李乐红等，斐媛等研究发现脾气虚动物模型的骨骼肌线粒体的形态与数量发生异常改变：伴随着肌原纤维间线粒体的数密度减少，线粒体的体密度增加；线粒体数量减少，大小不一，肿胀（可为正常线粒体的数倍），嵴部分或全部消失，基质透明，甚或溢出线粒体外，线粒体外膜结构破坏等；经健脾益气类药物治疗后，其结构恢复接近正常对照组；说明脾气虚所致肌肉失养的病理机制之一为骨骼肌线粒体结构损伤，从而影响骨骼肌的有氧代谢；也显示了健脾益气类药物具有缩短脾气虚证的损伤的线粒体修复时间的作用，刘劲等对番泻叶泻下法、劳倦过度法、番泻叶泻下法加劳倦过度法研制的脾虚小鼠在线粒体超微结构改变方面进行比较研究，结果发现三种脾虚小鼠模型十二指肠和骨骼肌会出现线粒体超维结构的改变，如线粒体肿胀、嵴减少、膜破损、基质溢出等，并且脾阳虚损害较脾气虚为重。尹德辉等通过研究发现脾阴虚衰老大鼠心肌、脑组织线粒体DNA（mtDNA）缺失及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活力发生异常改变，滋补脾阴方药对脾阴虚衰老大鼠的mtDNA、呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅳ活力有调控作用，提示mtDNA的氧化损伤，可能是脾阴虚衰老的物质基础之一。

2. 健脾药物对细胞线粒体保护作用的研究 陈晓春等研究观察到人参皂苷Rg1可抑制一氧化氮诱导的Pc12细胞凋亡，其作用机制可能与其稳定细胞线粒体跨膜电位，减少线粒体细胞色素C向胞浆释放及抑制caspase-3的激活有关。王立新等研究发现，黄芪多糖对内毒素处理小鼠肝细胞线粒体结构的损伤具有保护作用。陈立等研究发现，人参茎叶总苷对低气压性急性缺氧大白鼠脑皮质细胞线粒体有保护作用。彭成等研究表明，用人参、黄芪、党参、白术、山药、大枣分别治疗因食醋造成脾气虚证的大鼠，各药均能改善脾虚症状，增加肠上皮细胞线粒体。易崇勤等、彭成等研究表明四君子汤明显改善用小承气汤合并半量饮食塑造的小鼠消化功能紊乱模型的肝线粒体呼吸控制率，提高食醋致脾虚大鼠胃肠细胞线粒体琥珀酸脱氢酶和细胞膜Na＋-K＋-ATP酶活性。