【摘要】:三剂量法也就是用三种不同的剂量,包括标准品溶液和供试品溶液各用三种剂量,在同一试验条件下进行比较。选择的三种剂量一定要在校正曲线的直线段内,其剂间之比,一般用1∶1.25。3.测定方法 取备妥的双碟,在每一双碟中向相间的3枚小钢管中分别滴满高浓度、中浓度和低浓度的标准品溶液,其余3枚小钢管分别滴满相应的高、中、低三种浓度的供试品溶液,三种浓度的剂距以不超过1∶0.7为宜。
(一)设计原理
三剂量法也就是用三种不同的剂量,包括标准品溶液和供试品溶液各用三种剂量,在同一试验条件下进行比较。它的测定设计原理与二剂量法相似,只是多了一种剂量,因而也增加了结果的准确性。所以标定标准品的效价时,常用此法。选择的三种剂量一定要在校正曲线的直线段内,其剂间之比,一般用1∶1.25。
(二)计算公式
设:S1、S2、S3代表三种剂量的标准品抑菌圈直径
T1、T2、T3代表三种剂量的供试品抑菌圈直径
I=1g=(如剂距为1∶1.25时,则Ⅰ=lg0.0969)
计算公式为:lgθ=
将则I=lg1.25=0.0969代入即得
计算公式为:lgθ=0.1292(11)
算式中常数0.129 2随所用剂距而定,当剂距改变时,只需改变I即可。
(三)效价测定方法
1.材料准备 培养液、菌种、标准品、供试品及双碟的制备等均见中国药典附录XIA抗生素微生物检测法。
2.中剂量点的抑菌圈 直径应在16~18mm。
3.测定方法 取备妥的双碟(不<6个,一般为9个),在每一双碟中向相间的3枚小钢管中分别滴满高浓度、中浓度和低浓度的标准品溶液,其余3枚小钢管分别滴满相应的高、中、低三种浓度的供试品溶液,三种浓度的剂距以不超过1∶0.7为宜。
4.供试品的效价计算 根据测得数据可按上式计算。
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