脂肪吸取物和基质血管碎片

吸脂术是美容外科最常见的手术，仅2009年世界范围内就有160万例次手术实施。实施手术时，医师首先将盐水和肾上腺素（和麻醉药）浸润入脂肪组织中，然后应用一个直径为2～4mm的金属插管手动或者通过真空机器抽吸脂肪。在保留大血管和神经穿支完整性的同时，抽取大量的脂肪组织（100ml到几升）。脂肪抽吸物可分为两部分：上层的黄色部分是脂肪成分，含有漂浮的脂肪组织碎片；下层（粉色或红色）液体部分包含注射的盐水、外周血及沉积在底部的组织碎片。将脂肪部分通过胶原酶分解后，离心提取出了脂肪细胞外的细胞成分，即基质血管碎片（图7-2）。脂肪细胞在离心过程中受损破坏成为油脂漂浮其上，离心后丢弃。

图7-2　从脂肪组织抽吸脂肪干细胞/祖细胞分离的过程。吸脂术可以获取大量的脂肪（＞500ml)。脂肪抽吸物包含两部分：漂浮的脂肪部分和下面的液体成分。基质血管碎片（SVF）可从漂浮的脂肪中通过胶原酶消化而得。SVF包括大量血液衍生细胞（CD45+）和脂肪衍生细胞（CD45-）；后者可以进一步划分为CD31+/CD34+内皮细胞（ECs），CD31-/CD34+脂肪祖细胞（ASCs）和CD31-/CD34-的其他细胞

从适量的脂肪抽吸物中可以获取足够的脂肪组织衍生干细胞，这些细胞可以不必经由体外扩增而直接应用于临床。通常200ml脂肪抽吸物中就可分离出0.1亿～1亿的有核细胞，这些细胞中有至少10%是脂肪衍生基质细胞（图7-2）。与体外扩充的细胞相比，这些新鲜分离的细胞可以提供更加安全有效的临床治疗；FDA（21CFR PARTs 16、1270和1271）甚至将过夜培养的细胞定性为超过最低限度处理的细胞，已经证明经培养的脂肪组织衍生干细胞和新鲜分离的细胞表型明显不同。一些当前正在进行的临床试验应用的是新鲜分离的基质血管碎片，而不是提纯或者培养的脂肪组织衍生干细胞，这是因为在基质血管碎片中含有包括血管内皮细胞或者巨噬细胞等的其他细胞，这些细胞可能在治疗中发挥协同作用。