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检测病毒的方法抗原抗体法

时间:2023-04-18 理论教育 版权反馈
【摘要】:病毒感染的送检时采用双份血清,病毒分离培养方法有动物接种、鸡胚接种和组织培养。病毒感染的血清学诊断方法主要有中和试验、血凝抑制试验、补体结合试验和免疫扩散等。目前是病毒分离鉴定中最常用的基本方法。是用已知的病毒抗原检查病人血清中有无相应抗体。

本节热门考点

病毒感染的送检时采用双份血清,病毒分离培养方法有动物接种、鸡胚接种和组织培养。病毒感染的血清学诊断方法主要有中和试验、血凝抑制试验、补体结合试验和免疫扩散等。

病毒感染的检查方法

(一)标本的采集与送检

正确地采集和运送标本是病毒感染检查成功的关键,应该予以重视。

1.采集标本 必须根据临床诊断、病程、检查项目等不同采集不同的标本。如呼吸道感染应采集鼻咽分泌物或痰液;肠道感染取粪便;中枢神经系统感染取脑脊液;有外疹性疾病取疱疹内积液;有病毒血症者采集血液等。又如检测病毒抗体或分离病毒时,应在发病初期即急性期采集标本;检测抗病毒抗体时,应取双份血清,即在急性期和恢复期各取一份血清标本。

2.标本的处理 要尽可能做到无菌取材。对诸如鼻咽分泌物、粪便等本身就含有细菌的标本,应加入青霉素、链霉素、庆大霉素进行处理;对不能马上送检的组织、粪便等标本,应置于含有抗生素的50%甘油盐水中低温保存。

3.冷藏快送 标本采集后应立即送实验室检查,如离实验室比较远,则应将标本置于装有冰块或维持低温材料(如低温凝胶、固态二氧化碳等)的保温瓶中尽快送检。如暂时不能进行检查或作病毒分离培养时,则应将标本存放在-70℃低温冰箱中保存。

(二)病毒的分离培养方法

因病毒只能在活细胞内增殖,故须选择敏感的动物、鸡胚或离体的活组织来分离培养病毒。常用的方法有:

1.动物接种 是最早采用的病毒培养方法。常用的实验动物有小鼠、家兔。有的病毒分离需要接种珍贵动物如雪貂、猴、猩猩等。

2.鸡胚培养 首先将受精鸡蛋孵化成9~14天龄鸡胚,再将病毒接种于鸡胚的不同部位。

3.组织培养 是将离体的活组织块或分散的活组织细胞进行培养的方法。目前是病毒分离鉴定中最常用的基本方法。

(三)病毒感染的血清学诊断方法

是用已知的病毒抗原检查病人血清中有无相应抗体。IgM抗体的检测可帮助病毒性疾病的早期诊断;IgG抗体的检测则必须检测急性期和恢复期双份血清,恢复期抗体效价比急性期增高4倍或4倍以上有诊断意义。

1.中和试验 是利用病毒在活体内或细胞培养中被特异性抗体中和失去感染性的特性设计的一种试验,可用于检查病毒感染后或人工免疫后机体血清中抗体增长情况,也可用于鉴定病毒。此种定量中和试验常用于诊断。

2.补体结合试验 用已知病毒的可溶性抗原测定病人血清中有无相应抗体。补体结合抗体的特异性一般低于中和抗体,但补体结合抗体出现早、消失快,可用于早期诊断。

3.血凝抑制试验 许多病毒能凝集鸡、豚鼠、人的红细胞,称为血凝现象。这种现象能被相应抗体所抑制。本法的优点是经济、简便、快速、特异性高,可鉴别病毒型别与亚型。

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