有芽胞需氧革兰阳性杆菌

芽胞杆菌属(Bacillus)是一群需氧或兼性厌氧、有芽胞的革兰阳性大杆菌,包括48个种,其中炭疽芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌、蕈状芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌和苏云金芽胞杆菌5个种与医学有密切关系。

一、炭疽芽胞杆菌

【概述】炭疽芽胞杆菌(B.anthracis)是需氧芽胞杆菌属中致病力最强的革兰阳性大杆菌。本菌为致病菌中最大的革兰阳性杆菌,为(5～10)μm×(1～3)μm,两端平切,竹节状排列,有明显荚膜,有时呈S、T、O形排列。人工培养后涂片可见芽胞,芽胞卵圆形,位于菌体中央,不膨出菌体,可形成长链。

需氧或兼性厌氧,营养要求不高,最适生长温度为30～35℃。在普通琼脂培养基上18～24h形成扁平、灰白色、干燥而无光泽、不透明、边缘不整齐的菌落,低倍镜下观察菌落边缘呈卷发状。污染标本经处理后可接种于戊烷脒多黏菌素B等选择培养基,用此培养基培养时间稍长,菌落稍小。本菌芽胞的抵抗力很强,毒力和传播能力强,实验检查工作要在三级生物安全实验室进行。

【鉴别要点】分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、蕈糖,水解淀粉,不分解甘露醇和水杨苷,能还原硝酸盐,不产生吲哚和硫化氢,不利用枸橼酸盐,不分解尿素。在牛乳中生长2～4d牛乳凝固,然后缓慢融化。卵磷脂酶弱阳性、触酶阳性(表1-6-14)。噬菌体裂解试验、青霉素抑菌试验和串珠试验均阳性。

表1-6-14　炭疽芽胞杆菌与本属常见菌种的鉴别

+.90%以上菌株阳性;-.90%以上菌株阴性;V.11%～89%菌株阳性

【临床意义】炭疽芽胞杆菌是人类历史上最早被发现的病原菌,是引起炭疽的病原菌,微生物学检验在炭疽病诊断中具有重要意义,在标本采集、细菌分离培养和鉴定、感染标本处理中均应严格按照烈性传染病的防护原则进行。

炭疽是人畜共患的急性传染病,常在牧区暴发流行,牛、羊等草食动物发病率最高,疾病有明显职业性和地区性。人一般不会作为传染源。人类感染后以皮肤炭疽多见,其他尚可引起肠炭疽、肺炭疽等,三种炭疽均可并发败血症,甚至炭疽性脑膜炎。

目前炭疽在世界各地仍有散发流行,该病一直被列为世界五大兽疫之一。由于炭疽芽胞杆菌宿主广泛,传播方式多样,芽胞抵抗力极强,容易危害人类。国家卫生和计划生育委员会(原卫生部)于2005年颁布了《全国炭疽监测方案》。

荚膜和炭疽毒素是本菌的主要致病物质,炭疽病后可获得持久免疫力,再次感染罕见。

二、蜡样芽胞杆菌

【概述】蜡样芽胞杆菌(B.cereus)为需氧有芽胞的革兰阳性大杆菌。革兰阳性大杆菌,为(1～1.2)μm×(3～5)μm,菌体两端较钝圆,多数呈链状排列。生长6h后即形成椭圆形芽胞,位于菌体中央,不大于菌体,有动力,不形成荚膜。

需氧或兼性厌氧,营养要求不高,在普通琼脂平板上生长良好能形成芽胞,形成菌落较大,灰白色,不透明,表面粗糙似毛玻璃状或白蜡状,故名蜡样芽胞杆菌。在血琼脂平板上呈β溶血。

【鉴别要点】触酶阳性,分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖等,不分解甘露醇、木糖、鼠李糖,能胨化牛乳,液化明胶,VP、卵磷脂酶试验阳性。DNA酶阳性。根据形态结构、活菌计数、分离培养、生化反应等特点,可做出初步鉴定,但必须与类似菌加以鉴别(表1-6-14)。确定为蜡样芽胞杆菌后可继续进行生化分型、血清学分型、噬菌体分型及肠毒素检测。动力阳性可排除炭疽芽胞杆菌和蕈状芽胞杆菌;溶血,不分解甘露醇,可排除巨大芽胞杆菌;淀粉酶试验阴性和青霉素酶试验阳性,可排除苏云金芽胞杆菌。

【临床意义】蜡样芽胞杆菌广泛分布于自然界,可引起人类食物中毒。本菌引起的食物中毒以夏秋季最为多见。蜡样芽胞杆菌引起的食物中毒有两型,一类为腹泻型:由不耐热的肠毒素引起;另一类为呕吐型:由耐热的肠毒素引起。近年来,发现蜡样芽胞杆菌除可引起食物中毒外还可引起外伤后全眼球炎、心内膜炎、脑膜炎和败血症等。在我国主要与受污染的米饭或淀粉类制品有关。不能因分离出蜡样芽胞杆菌就认为是引起食物中毒的病原菌,每克或每毫升食物中细菌数>105有诊断价值。

(赵建宏　张金艳　李贵霞)