不规则抗体筛查和鉴定

不规则抗体是指ABO系统以外的抗体,是引起免疫性溶血性输血反应、新生儿溶血病和自身免疫性溶血性贫血的主要因素之一。因此,为了保证输血安全,提高输血疗效,减少或杜绝溶血性输血反应的发生,不规则抗体检查必须作为输血前检查的重要项目之一。对受血者的血清,应常规做抗体筛查试验,以发现有临床意义的不规则抗体。同时,对供血者的血清也要做抗体筛查试验,以确保供血者的不规则抗体不进入受血者体内,使输入受血者体内的血液安全有效。

一、不规则抗体的筛选

【检测方法】微柱凝胶检测法。

【结果判定】筛检细胞沉积在微柱凝胶管尖底部,判断为阴性。除此之外可判定为阳性,进一步做抗体鉴定。

【注意事项】

1.严格按实验操作规程进行,血清和筛检细胞比例合适。

2.血清标本要注意新鲜血标本中纤维蛋白对试验的影响,容易造成假阳性。

3.如果使用的是血浆标本,一定要用标准的含抗凝剂的标本管采集,否则血浆中纤维蛋白在微柱离心时析出,阻挡分散的红细胞下降,容易出现假阳性结果。

4.筛检细胞要新鲜无溶血,配制好的红细胞使用时间不超过24h。要避免红细胞或血清标本染菌,尽可能使用当日采集的新鲜血标本。

5.微柱凝胶管中出现溶血现象,特别提示为红细胞抗原抗体阳性反应,也不排除其他原因所致溶血,对此标本一定要认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论。

二、不规则抗体的鉴定

不规则抗体筛选阳性后,要对抗体特异性进行鉴定。

【检测方法】根据筛选抗体的特异性选择不同的试验方法,如盐水法,酶法,抗人球蛋白法,吸收、放散等血清学试验。

【注意事项】

1.没有一种最理想的单一方法适用于所有标本,能检出所有抗体。

2.对受检者的血清与自身红细胞反应的情况要认真观察,以便证实血清内是否有自身抗体,或自身抗体与同种抗体二者共存。

3.用多种抗体检测技术,以及使用试验红细胞中的谱细胞,检测受检者的血清以确定其抗体的特异性。

(1)试剂谱细胞一般由8～16个人的已知血型表现型的O型红细胞配套组成,具有各种不同的抗原成分,根据谱细胞的反应格局一般可以鉴定常见的抗体。不同的特异性抗体要选用相应的谱细胞进行试验。

(2)为了保证抗体鉴定的正确性,要求每个抗原要有足够的阳性和阴性细胞。同时,必须灵活运用盐水试验法,抗人球蛋白法,酶法,再结合吸收、放散等血清学特殊试验,从而获得客观真实的抗体结果。

(3)要对谱细胞反应结果有正确的解释,必须首先对一些特异性抗体血清学特性进行分析,再分析反应结果,确定抗体特异性时可综合运用下列资料:①观察受检血清与每个试剂谱细胞的反应结果;②观察受检血清与其自身细胞的反应结果;③观察受检血清与酶处理细胞的反应结果;④观察反应格局,检查各个反应格局的结果,包括不同温度、悬浮介质或酶作用的情况,一些抗体的特异性与反应相直接相关;⑤是否有溶血;⑥在阳性反应的细胞中,反应强度是否不同,是否出现剂量效应;⑦对自身红细胞上的抗原详细检查,从所缺少的抗原情况,提示是否存在相应抗体;⑧抗体效价滴定。

【临床意义】红细胞血型抗体检查适用于下列情况:

1.ABO血型鉴定发现受检者血清中有意外抗体时。

2.供血者血清抗体筛检。

3.输血前受者血清抗体检查。

4.输血后溶血反应疑为由同种抗体引起时。

5.孕妇血清的抗体检查。

6.新生儿溶血病婴儿血液中抗体检查。

7.直接抗球蛋白试验阳性红细胞上抗体的检查。

(邵智利　陈　静)