【摘要】：放置时,先使盖玻片的一边接触到载玻片上菌液的边缘,然后缓慢放下,覆盖于菌液上,避免菌液中产生气泡。可通过缩小光圈和调节聚光器上下位置来控制光线亮度,以达到最佳效果。温度低,细菌动力下降,故气温较低时,操作应快,同时应注意保温。衰老菌体动力下降,因此最好用培养8～10h的培养物做试验。
【菌种】变形杆菌、葡萄球菌。
【试剂】生理盐水。
【器材】普通光学显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯、镊子、火柴等。
【操作步骤】
1.操作前准备 戴口罩、帽子、手套,穿工作服,准备并清点本试验所需器材。
2.制片 取洁净载玻片1张,在玻片左右各1/3处滴加一滴生理盐水,将接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌,待冷却后分别挑取变形杆菌、葡萄球菌菌落少许,均匀涂布于生理盐水中,并研磨成直径1～1.5cm的菌膜。
3.盖片 用镊子取一盖玻片,覆盖于菌液上。放置时,先使盖玻片的一边接触到载玻片上菌液的边缘,然后缓慢放下,覆盖于菌液上,避免菌液中产生气泡。
4.结果判断 置于普通光学显微镜下观察。先以低倍镜找到欲观察范围,再换高倍镜观察细菌是否运动。
5.其他 操作后正确处理医疗垃圾,实验器材归回原位。
【注意事项】
1.制片时挑取的菌量应适当,制片完成后应尽快观察,避免水分蒸发影响观察结果。
2.盖片时,应沿菌液边缘缓慢放下,避免菌液中产生气泡,以免影响镜检结果。
3.镜下观察时,背景稍暗易于观察,故光线不宜过亮。可通过缩小光圈和调节聚光器上下位置来控制光线亮度,以达到最佳效果。
4.观察时,注意区别水流带动的运动与细菌本身的运动。
5.整个操作过程须注意无菌操作和生物安全防护,防止菌液外溢污染显微镜等外环境。
6.操作时应注意室温和菌液培养时间。温度低,细菌动力下降,故气温较低时,操作应快,同时应注意保温。衰老菌体动力下降,因此最好用培养8～10h的培养物做试验。
【技能要点】
1.制片要求菌膜薄厚适中。
2.正确加盖盖玻片。
3.熟练使用光学显微镜。
(张金艳 郭映辉)
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