【目的】正确掌握生物安全柜的使用,确保工作人员健康,相应样本及试剂不受污染。
【器材】Ⅱ级生物安全柜。
【操作步骤】
1.使用前请检查各部位电源是否接好,有外排风机的,请检查外排风机是否装好。
2.打开电源锁,按下控制面板上的[电源]键,系统通电进入待命状态,液晶屏上显示当前的时间、温度、湿度、预约开机或关机时间、压差。
3.按下[紫外灯]键,开启紫外灯消毒30min后将紫外灯关闭(注:此时玻璃门应是关闭状态)。
4.按下[玻璃门开启]键,打开玻璃门到标识处。
5.按下[风机]键,开启风机15min左右,使操作区达到规定的洁净度。
6.按下[照明]键,开启照明灯,操作人员方可进行工作。
7.在试验结束前,将试验材料适当处理后,让安全柜再运行5min,以完成内部的净化。
8.关闭风机、玻璃门,打开紫外灯消毒30min,以杀灭残留在安全柜内部的病菌。
9.关闭紫外灯,打开玻璃门,用含氯消毒剂或75%乙醇消毒台面、内壁及集液槽。若用腐蚀性的化学剂消毒后,还应用灭菌水再擦洗。
10.关闭电源。
【注意事项】
1.在生物安全柜的后面及每一个侧面都应该留有30cm的空间以便于对生物安全柜的维护。
2.生物安全柜在使用中,前玻璃挡板应处于工作状态(开口20cm或略小)。
3.生物安全柜中的器材和设备应减至最少,请在距工作区周边15cm范围内进行操作,建议大型容器间应留有空隙。
4.生物安全柜内应避免使用明火,使用明火会对气流产生影响,并且在处理挥发性物品和易燃物品时,也易造成危险。若要对微生物接种环进行杀菌,应该用小型燃烧炉或电炉。
5.在试验操作前,操作者应该调整凳子高度,使自己的面部在玻璃悬窗开口之上,在手臂放进安全柜内1min后才能进行实验操作,停留的目的是为了使安全柜稳定,并且能让气流“清扫”手套和手臂表面的微生物。当操作者的胳膊静置平放于前格栅上时,室内空气可能直接流向工作区域而不是流入前格栅,稍抬起胳膊可缓解该问题。绝不能让试验记录本、废塑料包装物、吸样器等堵住前格栅,所有操作都应在操作平面中部或后部距前格栅10cm以内进行。
6.工作台面物品摆放原则
(1)在工作台面上的试验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行,被污染的物品尽量不要进入清洁区域,应放置在工作区域的后部。
(2)所有物品应当尽可能放在安全柜工作台后部靠近工作台后缘的位置,并使其在操作中不会阻挡后部格栅。
(3)易产生气溶胶的设备(如混匀器、离心机)应当放在安全柜的后部。
(4)体积较大的物品如生物危害性的废物袋,盛废弃移液管的盘子及负压吸引器,应当放在安全柜内的某一侧。
(5)耐高压灭菌的生物危害性废物袋和收集移液管的盘子不应当放在安全柜外面。否则在使用这些物品时双臂就必须频繁进出安全柜,这样会破坏安全柜内的空气屏障的完整性,从而影响对人员和物品的防护。
7.尽量减少在操作者背后的走动,房间内不应有产生干扰气流的设备,安全柜的正面不应对着经常开启的门窗。
8.操作者的手臂不可频繁出入生物安全柜,否则会打乱气流,破坏保护空气屏障。
9.在生物安全柜内工作时可采取一些避免发生交叉污染的措施:开口的试管和瓶子不应垂直放置,工作人员用培养皿和组织培养皿时应拿着盖遮其上方(直立式吸管收集容器不应在生物安全柜内使用)。以减少下降气流直接冲击敞开的无菌表面,瓶盖和试管帽操作完成后应尽快重新盖上。
10.生物安全柜电源为220V、50Hz,必须做到可靠接地后方可使用。
11.鉴于生物安全柜的危险性,建议操作人员切勿自行维修,当设备发生故障而操作人员不能排除和需要更换安全柜中的零部件时,请立即与公司培训合格的技术人员联系维修。
【技能要点】
1.熟练掌握生物安全柜的使用方法。
2.了解生物安全柜内物品摆放位置。
3.掌握生物安全柜的日常保养。
(李立新 陈 兴)
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