真胰岛素测定

一、概 述

胰岛素是由胰岛B细胞合成和分泌的蛋白质激素,由A和B两条链组成。A链和B链分别含有21和30个氨基酸残基,分子量为5734。胰岛素的生理作用主要是促进葡萄糖的利用和糖原合成,抑制糖原异生,从而维持血糖恒定。测定血清(浆)胰岛素水平并结合血糖变化是判断B细胞的功能是否正常以及估计胰岛素敏感性的常用手段。然而由于胰岛素和胰岛素原的抗原性有很大程度的交叉,而目前常用的免疫分析法特异性很差,不能区分血中共存的胰岛素和胰岛素原,所测定的是免疫反应性胰岛素,即胰岛素与胰岛素原及其他胰岛素类似物的总体水平,而不是胰岛素的真正含量。现推出的研究用胰岛素ELISA试剂盒,选取针对胰岛素不同抗原决定簇的两种单克隆抗体(单抗)分别固化于微孔中和生物素标记,采用双抗体夹心模式和生物素—亲和素放大系统,具有特异性强、灵敏度高和操作简便等优点,可准确测定人血清(浆)中胰岛素的含量,此为真胰岛素(trypsin,TI),它适用于以下几种。

1.评价B细胞的功能和估计胰岛素抵抗性,研究肥胖、糖尿病、高血压和冠心病的病理生理。

2.1型糖尿病和2型糖尿病的鉴别诊断。

3.诊断胰岛素瘤。

4.2型糖尿病患者口服降糖药的选择等。

二、病人准备

1.药物

(1)在病人未确诊或未进行系统检查的情况下,要求病人正常饮食,在保证病人安全的情况下,停用治疗药物2～4周,包括胰岛素、降压药等。

(2)病人在确诊糖尿病后,用药一段时间,需进一步了解胰岛功能,一切按平时的饮食及用药情况进行。

(3)限制使用促肾上腺皮质激素、甾体类激素(包括激素避孕药)、促甲状腺素药、肾上腺素和其他可能会影响试验结果的药物。如果这些药物必须持续使用,应在申请单上注明。

2.饮食

(1)试验前日晚餐后禁食10～12h。

(2)整个试验过程中不可吸烟、喝咖啡、喝茶或进食。

三、标本采集

1.采集时间 同胰岛素测定试验。

2.标本保存 实验室应在取血后5h内离心分离血清,所分离的血清中胰岛素在室温下可稳定12h,在4℃可稳定1周,在-20℃可稳定1个月。

四、注意事项

1.运动以及各种应激状态均可使内分泌系统出现短暂紊乱,应注意避免。

2.如已确诊为糖尿病,为了解胰岛功能可考虑用馒头餐试验。

3.儿童服糖量按1.75g/kg体重计算,总量不超过75g。

4.如果有过高血糖史,应该用100g面粉的馒头代替葡萄糖粉做馒头餐试验。

5.整个试验过程中禁用茶、咖啡、食物和乙醇,禁烟,可适量饮水、站立、慢走和端坐,不能剧烈活动。

6.患者在服糖后,若出现较重的无力、头晕、胃不适等症状,应及时处理,让患者平卧,并饮用少量温水,以缓解症状。

五、试验方法及正常参考范围

单克隆抗体BA-ELISA法:将已知的抗体与固相载体连接,形成固相抗体,洗涤出去未结合的抗体,加入待测标本,使标本中的抗原与固相抗体反应而被固定,洗涤除去其他未结合物,加入酶标特异性抗体,经一定时间反应,形成抗体-抗原-酶标抗体的夹心式复合物,洗涤除去未结合的酶标抗体,加入酶底物:固相上的酶催化底物形成有色产物,终止反应后比色,测定被测标本中的抗原量。

正常参考范围 空腹真胰岛素水平:1.5～11.5pmol/L。

六、临床意义

1.评估空腹低血糖。

2.评估胰岛素的分泌。

3.监测胰腺手术效果。