胰岛素自身抗体测定

一、概 述

胰岛素自身抗体可在1型糖尿病的亚临床期和临床期出现。这些抗体和人胰岛素反应,同时与其他物种的胰岛素有交叉反应性。

在少数胰岛素依赖性糖尿病病例中,患者体内的胰岛素抗体由外源性胰岛素引起,称为胰岛素抗体(IA)。

二、病人准备

试验前几日正常饮食,采血当天空腹;干扰素可增加抗体的产生,医师及患者应根据具体情况考虑药物是否继续使用。

三、标本采集

1.采集时间 清晨空腹,应在下一次注射胰岛素之前采集标本,因为这些抗体和人胰岛素反应,同时也与其他物种的胰岛素有交叉反应性。采集静脉血2ml于标准样本管中,4h内送检。

2.标本保存 实验室收到标本后离心分离血清,标本2～8℃可稳定7d,-20℃至少可稳定1个月,禁用叠氮钠防腐。

四、试验方法及正常参考范围

酶联免疫分析法;应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中IAA水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入IAA抗原、生物素化的抗人IAA抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的IAA呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

正常人结果为阴性,不同的检测方法和药盒其特异性和敏感性可能存在较大差别,结合ICA和GAD其意义更大些。

五、临床意义

1.评价1型糖尿病危险性 IAA作为额外指标对预测儿童糖尿病有特殊意义。在1型糖尿病患者的一级亲属中IAA的检出率约为2%。若同时出现ICA,高效价IAA与1型糖尿病的发展密切相关。如果仅IAA阳性,而ICA、GADA阴性,糖尿病危险性仅轻度增高。

2.胰岛素自身免疫综合征 指在从未用过胰岛素的受试者体内出现了高浓度的免疫活性胰岛素和高效价的IAA,引起自发性低血糖。

3.胰岛素抵抗 人或动物胰岛素抗体(目前的胰岛素自身抗体测定方法和试剂还不能区分是内源性胰岛素产生的抗体还是外源性胰岛素产生的抗体)。

抗胰岛素细胞抗体的相应抗原可能是胰岛细胞的胞浆或微粒体的某些成分,有器官特异性而无种属特异性,主要是IgG型。此抗体的检测对胰岛素依赖性糖尿病(1型糖尿病)和非胰岛素依赖性糖尿病(2型糖尿病)的鉴别诊断有一定意义。而IAA是在合并有黑色棘皮症的胰岛素抵抗综合征病人中发现的,对于这种病的诊断有很大意义。