甲状旁腺素相关蛋白测定

一、概 述

1987年,甲状旁腺相关蛋白(parathyroid hormone-related protein,PTHr P)被证明能引起肿瘤相关高钙血症。它通过刺激存在于骨、肾内的经典PTH受体而作用于钙代谢。PTHr P由141个氨基酸残基构成,有3种异构体(139、141和173个氨基酸残基),以前激素的形式合成经转换酶水解为N末端PTHr P(1-36)、中间部分PTHr P(38-94)、C末端PTHr P(107-139)或C-PTHr P等至少3个片段向血中分泌,完整PTHr P在血中不存在。人PTH和N末端PTHr P的前13个氨基酸中的8个氨基酸是相同的,因此PTHr P可通过氨基末端结合于PTH受体,具有PTH样骨吸收抑制作用;而C-PTHr P相反,有强力骨吸收抑制作用。中间部分在胎盘,与胎儿钙摄取等钙代谢相关。

生理作用:PTHr P发挥生理作用大多与钙代谢的调节无关。不像PTH,PTHr P到处表达。PTHr P被认为是组织特异性功能的自分泌或旁分泌的局部调节因子。

二、标本采集

1.采集时间 N末端PTHr P易受蛋白酶分解,极不稳定,采集静脉血1 ml于EDTA抗凝管中,并加蛋白酶抑制剂(抑肽酶),立即冰水浴送检。C末端PTHrP生物活性稳定,可从尿中排泄,所以用血清、EDTA血浆、尿测定均可。

2.标本保存 全血中PTHrP比血浆中降解快得多,且通过检测其半衰期仅有4h,因此收到标本要立即离心分离血浆冷冻。-70℃可长期保存。

三、试验方法及正常参考范围

酶联免疫吸附法:用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗PTHr P抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗PTHr P抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的PTHr P呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

四、临床意义

1.已知或可疑肿瘤(相对指征)的高钙血症的鉴别诊断。

2.实体肿瘤,特别是乳腺、肾和小细胞肺癌进行治疗时,监测高钙血症。

3.作为乳腺癌骨转移的预后因子。

4.双磷酸盐治疗中(相对指征)的监测。