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脂联素测定

时间:2023-04-20 理论教育 版权反馈
【摘要】:颜色的深浅和样品中的脂联素呈正相关。近年研究表明,低脂联素血症是冠心病的危险因素之一,高脂联素者心血管病病死率降低。超重或肥胖组血脂联素水平明显低于体重正常组;腹型肥胖者较非腹型肥胖者脂联素水平显著降低。肥胖患者胃部手术后,随着体重减轻脂联素浓度升高。

一、概 述

历来认为,脂肪组织主要是能量蓄存;近年证明,脂肪组织同时又是内分泌组织,具有分泌脂联素、纤溶酶原活化物抑制物、肝素结合上皮细胞生长因子样增殖因子、瘦素、血管紧张素原、肿瘤坏死因子等多种生物活性物质的功能。

在人体脂联素是由脂肪组织特异基因ap M 1转录的产物,为244个氨基酸的分泌蛋白,N端部由66个氨基酸组成的纤维状区C端部同补体C1q样的球状区构成。在血中以三聚体、六聚体和多聚体的形式存在。与内皮下胶原Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分子特异性结合。如果在血管内聚集,则有损害血管的特性。

二、病人准备

1.药物 有报道,过氧化物酶体增殖物活化受体配体的噻唑烷衍生物、血管紧张素转化酶抑制药、血管紧张素Ⅱ的Ⅰ型受体拮抗药及磺脲类口服降糖药格列苯脲等药物,有提高脂联素血浓度的作用,应在检测前停药或换其他药物代替。

2.饮食 采集标本前几天必须安排普食,不可通过饮食来调节体重;采集当天不受饮食影响。

3.影响因素 无日内变化节律,虽由脂肪细胞分泌,但在脂肪组织增多或体重指数(BMI)增大时分泌减少;相反,体重减轻,分泌增加。此外,不减轻体重的定期锻炼,也不会改变血清脂联素浓度。

三、标本采集

1.采集时间 采集静脉血于普通试管或EDTA、肝素抗凝管中,血清、血浆测定结果无差异。2.标本保存 分离血清或血浆后室温稳定8h,冷藏保存1周,-20℃以下冷冻可长期保存,反复冻融对血浆脂联素无影响。

四、试验方法及正常参考范围

酶联免疫吸附法:用纯化的抗-脂联素(ADP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂联素,再与HRP标记的脂联素抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂联素呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人脂联素浓度。

正常参考范围 2~20μg/ml(mg/L)

       男性均值5.5μg/ml

       女性均值8.7μg/ml

冠心病危险性切点值不分性别推荐采用4μg/ml,血浓度大体呈正态分布,女性较男性高,但与Leptin不同,女性在绝经期前后血浓度无变化。

五、临床意义

1.浓度与体重指数明显呈现负相关,动脉粥样硬化性疾病脂联素降低,特别是<4μg/ml的男性。近年研究表明,低脂联素血症是冠心病的危险因素之一,高脂联素者心血管病病死率降低。

2.糖耐量受损或2型糖尿病血脂联素降低,胰岛素敏感性与脂联素血浓度呈正相关,脂联素减少胰岛素敏感性减弱,脂联素增高者糖尿病发病的危险性减小。

3.肥胖。超重或肥胖组血脂联素水平明显低于体重正常组;腹型肥胖者较非腹型肥胖者脂联素水平显著降低。肥胖患者胃部手术后,随着体重减轻脂联素浓度升高。

4.糖尿病和非糖尿病患者通过低热量饮食使体重下降,则血浆脂联素浓度增加。

5.脂联素血浆浓度与冠状动脉疾病患者吸烟状况有关。

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