一、概 述
心钠素(atrial natruretic factor,ANF)又叫心房利钠多肽,由心房产生和分泌,是一种具有耐热、耐酸、易被羧基肽酶和氨基肽酶水解的具有生物活性的多肽激素,由126个氨基酸组成,其分子量为,A型ANF3000,B型ANF5000,R型ANF13 000。ANF的生理作用广泛,除利钠、利尿、扩张血管和降血压作用外,还可抑制肾素、醛固酮和加压素的分泌,由此说明心脏不仅是一个血循环的动力器官,而且也是一个重要的内分泌器官。
二、病人准备
1.药物
(1)麻醉可使其浓度下降,但在术后早期,浓度高于初始浓度,而在术后晚期又恢复到正常水平。
(2)脑钠肽在正常人和充血性心力衰竭患者中均会使ANF升高;多巴胺在正常人可见升高,在后者中无变化。
2.饮食
进食会使测定结果显著降低。
3.影响因素
(1)急性失血、体能训练者训练后会导致ANF浓度下降。
(2)对急症(比如切除动脉瘤)患者补液后,血浆ANF浓度会增高。
(3)晨7:00～8:30,不卧床女性的血浆浓度显著下降,正常健康体检者仰卧位其浓度比坐位或直立位高。
(4)产后比妊娠期高,妊娠期比非妊娠期高。
(5)低盐膳食的高血压患者平均浓度比高盐膳食时明显降低。
(6)随年龄增长浓度增高。
(7)在高原地区可诱发高山反应的人ANF浓度会升高,而不诱发的其浓度基本不变。
三、标本采集
1.采集时间 取空腹静脉血3.0ml,置于30μl 10%的EDTA Na2和500KIU抑肽酶试管中,混匀,冰水浴立即送检。不可用枸橼酸盐和肝素抗凝的标本(置于冰上,用枸橼酸盐抗凝平均浓度即刻下降38%～52%,用肝素抗凝平均浓度下降15%～20%)。
2.标本保存 收到标本后立即分离血浆,即测,血浆在冰水浴上放置1h结果稳定,室温下不稳定,一般不作储存,在-80℃保存3d内(或1周以后)浓度显著下降,标本溶血会使结果偏高,故不宜用溶血标本检测。
四、试验方法及正常参考范围
1.酶联免疫吸附法 用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗ANF抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗ANF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的ANF呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
2.增强化学发光法 利用抗原抗体特异性结合及酶底物Luminol发光体系定量检测ANP。
正常参考范围 男性:356.0pg/ml±76.0pg/ml
女性:352.0pg/ml±58.0pg/ml
五、临床意义
1.ANF升高的常见疾病 原发性醛同酮增多症、嗜铬细胞瘤、皮质醇增多症、糖尿病、肢端肥大症和巨人症、甲状腺功能亢进症、充血性心力衰竭、肝硬化、慢性肾衰竭(CRF)以及其他,如Barrter综合征、肾动脉狭窄、多种心瓣膜病、冠心病、心肌病、室上性心动过速等,均可使ANF升高。
2.ANF降低的常见疾病 甲状腺功能减退症、Gordon综合征等。
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