内皮素测定

一、概 述

内皮素(endothelin,ET)是一种首先由猪的血管内皮细胞中分离纯化出的21个氨基酸组成的生物活性多肽,人的ET有3种基因表达,即ET-1,ET-2,ET-3,其中以ET-1活性最强。内皮素具有强烈的收缩冠状动脉、肾小动脉、刺激心纳素的释放,提高全身血压,抑制肾素释放等作用,它是迄今为止已知最强的收缩血管物质。现有资料表明,ET浓度与心血管疾病、呼吸系统疾病、消化系统疾病、神经系统疾病以及妇产科疾病的发生发展均有密切联系。

二、标本采集

1.采集时间 容器置于冷藏处收集24h尿或用预冷采血器取空腹静脉血2ml,注入含10%EDTA二钠30μl和抑制肽酶40μl的试管中,混匀,置冰盒内立即送检。

2.标本保存 收到标本后,立即4℃3000r/min离心10min,分离血浆后即刻检测,或者于-20℃保存2个月,-70℃保存6个月。

三、注意事项

1.在某些急症时,如脓血症、外伤、休克以及病危时可见其浓度升高。

2.寒冷刺激可见其浓度有不同程度的升高。

3.血清胆固醇浓度高于2.5g/L的吸烟患者明显高于不吸烟的患者。

四、试验方法及正常参考范围

放射免疫分析法应用竞争机制原理,标准或样品中的ET和加入的125 I-ET共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。125 I-ET与抗体的结合量与标准或样品中ET的含量呈一定的函数关系。用免疫分离试剂(P.R.)将结合部分(B)与游离部分(F)分离后,测定结合部分的放射性强度,并计算相应结合率B/B0。用已知标准ET含量与对应结合率作图,即得标准抑制曲线。从标准曲线上查知对应结合率的待测样品中ET的含量。

正常参考范围　血液RIA:1.0pg/ml±0.5pg/ml(ng/L)

　　　　　　　　　EIA:<5pg/ml(ng/L)

　　　　　　　尿液:67.6ng/24h±35.5ng/24h

五、临床意义

1.血ET增高见于原发性高血压、血管障碍(动脉粥样硬化、血栓闭塞性脉管炎、糖尿病)伴有慢性血管损害时、慢性肾功能不全,此外,心功能不全、急性心肌梗死、肺动脉高压、外科手术后、子痫前期、缺血性脑血管病、原发性醛固酮增多症、支气管哮喘等也见升高。

2.尿ET增高见于正常人血浓度很低,而尿排泄量远高于血浆水平。尿免疫活性ET-1不仅是血中ET-1由肾清除而来,主要来源于肾小管上皮,是肾小管分泌的一种肽,其排泄量反映肾小管的损害程度,可作为肾小管损害的指标。