咽喉中存在的细菌较多,可以有厌氧及需氧性链球菌、葡萄球菌、肺炎球菌、四联球菌、脑膜炎球菌、卡他球菌、喉杆菌、结核杆菌、枯草杆菌、百日咳杆菌、肺炎杆菌及铜绿假单胞菌等。此外,也可有白色念珠菌、奋森螺旋体等。本检查以咽拭子作为标本,通过咽拭标本进行病原体培养的检查方法。主要用于检查小儿常见细菌、衣原体、支原体、口腔毛滴虫、真菌等。咽拭子培养主要用于上呼吸道感染的诊断和治疗。咽拭子培养报告结果受多种因素影响,比较复杂。
1.目的 从咽部和扁桃体取分泌物做细菌培养或病毒分离,以协助诊断。
2.用物 无菌咽拭子培养管,酒精灯,火柴,无菌生理盐水,压舌板。
3.操作方法 备齐用物,贴好标签,向患者说明目的及配合方法,以取得合作。点燃酒精灯,将拭子取出蘸无菌生理盐水(必要时以压舌板轻压舌部),嘱患者发“啊”音使之口张大,以轻快的动作,迅速擦拭两侧腭弓及咽、扁桃体的分泌物后,迅速将试管口在酒精灯火焰上消毒,将拭子插入试管中塞紧,并立即送验。送检后进行接种,种于培养基上,放入培养箱。
4.注意事项 咽拭子培养时,应在清晨先用淡盐水(约1%)漱口后,方可采样留取标本,这样可以将口腔中杂菌清理掉,以便准确地查出上呼吸道及下呼吸道的感染细菌。
5.其他 如在痰及咽拭子分泌物中检测出致病菌,则视为呼吸道感染。可结合其他检查(X线透视、B超等)诊断呼吸道感染部位。呼吸道感染常见细菌有:葡萄球菌属、肺炎双球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯菌、葡萄球菌、链球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌等。如培养出结核分枝杆菌,则为肺结核。如培养出类酵母菌则考虑是否在感染期间使用抗生素不当或过量,应当立即停止使用抗生素,改用抗真菌药物,如两性霉素B、灰黄霉素、克霉唑等。
6.可根据下述特点进行鉴别
(1)在菌落周围产生2~4mm宽、界线分明、完全透明的溶血环、涂片为革兰阳性球菌并呈链状排列,可能是乙型溶血性链球菌。
(2)菌落细小、半透明、有草绿色溶血环、涂片为革兰阳性球菌呈链状排列,可能为甲型溶血性链球菌。需要进一步与肺炎球菌区别时,可做胆汁溶菌试验及菊糖发酵反应。
(3)菌落细小半透明、不溶血、涂片为革兰阳性链状排列的球菌时,为丙型链球菌。
(4)菌落扁平边缘隆起、中央稍凹、半透明、呈草绿色溶血、革兰染色为阳性双球菌、呈矛头状排列时为肺炎球菌,应以胆汁溶菌及菊糖发酵反应与甲型溶血性链球菌区分。
(5)菌落中等大小、表面光滑、呈灰色、革兰染色为阴性双球菌,呈肾形排列时,可能为脑膜炎球菌,需要进一步做氧化酶试验及糖发酵试验(接种于含血清之葡、麦、蔗糖发酵管中)。
(一)衣原体肺炎
鼻咽拭子涂片做姬姆萨染色可见病原体呈碘染的胞质内包涵体;采用细胞培养做病原体分离;双份血清检查抗体或做抗原检测可以帮助诊断;或用单克隆抗体通过直接荧光染色或ELISA检测抗原做快速诊断。
(二)真菌性肺炎
1.念珠菌性肺炎
(1)真菌检查:咽拭、痰液、粪便、病灶组织或假膜、渗液等均可。
(2)直接涂片镜检:将上述标本少许置于玻片上,加1滴10%氢氧化钾,放上盖玻片后轻微加热,然后镜检,可见假菌丝及孢子。由于健康人可以带菌,均须多次镜检阳性或在该菌平时不寄生的部分取到标本,镜检阳性者才有诊断意义。
(3)真菌培养:可同时将以上标本接种于常用的真菌培养基(沙氏培养基)。多在3~4d出现乳白色光滑的菌落,如该菌落数50%即有诊断意义。
2.肺曲霉菌病
(1)直接涂片检查:由患处所得的标本,做直接涂片,镜检可见菌丝或曲霉菌孢子。
(2)培养:取痰、血、局部受损的组织等均可做曲霉菌培养。曲霉菌是实验室中常见的污染菌,故只有反复培养出同一曲霉菌并结合临床表现,方有诊断价值。
(三)毛细支气管炎
鼻咽拭子细菌培养与健康儿无明显不同(二者均可有带菌情况)。
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