【摘要】：因此,脱蜡时间需延长,以保证脱蜡充分。
(一)试剂配制
1.试剂 碱性品红乙醇贮备液:碱性品红5g加95%乙醇100ml;5%苯酚水溶液:苯酚5ml加蒸馏水95ml。
2.配制方法 用前取5%苯酚水溶液9ml加入碱性品红乙醇贮备液1ml,混合均匀,滤纸滤过,直接使用。
(二)操作方法
1.切片用松节油-汽油等份混合液脱蜡2次,每次5~10min。
2.滤纸吸干余液。
3.自来水洗,蒸馏水洗。
4.苯酚碱性品红液染色20min。
5.自来水洗,蒸馏水洗。
6.用20%硫酸水溶液分化,边冲洗边分化直至适当为止(镜下控制)。
7.Mayer苏木素细胞核染色1~2min。
8.流水冲洗5~10min。
9.切片风干,二甲苯透明,中性树胶封固。
(三)结果
麻风杆菌,结核杆菌:鲜红色;细胞核:蓝色。
(四)注意事项
1.苯酚(石炭酸)与品红液应分别储存。
2.最好用硅化切片,以增加附贴度及避免硫酸反复分化引起切片脱落。
3.脱蜡用松节油和汽油混合液以免破坏细菌的类脂质,但脱蜡强度不如二甲苯。因此,脱蜡时间需延长,以保证脱蜡充分。
4.苯酚碱性品红液易发生沉淀,用前必须过滤。
5.核染色时间不宜过长,染完后不需用酸性乙醇分化,因其会使红色脱去。当然,脱水也不能用乙醇。
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