【摘要】:3.还原液 焦酚10g加入蒸馏水450ml,再加无水乙醇550ml,然后加1%硝酸2ml,用前静置24h。
(一)试剂配制
1.酸性福尔马林(25%) 将福尔马林25ml与蒸馏水75ml混合,再加1%硝酸0.2ml。
2.银溶液 硝酸银15g,硝酸钾(potassium nitrate)10g加入蒸馏水10ml混合,再加5%醋酸氨(amino acetic acid)1ml。
3.还原液 焦酚(pyrogallol)10g加入蒸馏水450ml,再加无水乙醇550ml,然后加1%硝酸2ml,用前静置24h。
4.调色液 氯化金1g加入蒸馏水200ml,再加无水乙醇550ml,然后加1%硝酸2ml。
5.加强剂 苯胺油(aniline oil)2滴加入50%乙醇100ml。
6.固定液 用5%的硫代硫酸钠。
(二)操作步骤
1.硅化载玻片裱片,60℃烘烤2h。
2.切片脱蜡至水。
3.用0.5%~1%高锰酸钾水溶液处理5min。
4.自来水洗,蒸馏水洗。
5.用2%草酸水溶液处理2min。
6.自来水洗,蒸馏水洗。
7.酸性福尔马林处理5~10min。
8.蒸馏水洗3次,每次2min。
9.银液处理10min(37℃)。
10.加已预热达45℃的还原液,甩掉还原液,再加还原液,反复数次,至满意结果。
11.用50%乙醇苯胺油轻洗10min。
12.蒸馏水洗3次。
13.用氯化金调色。
14.自来水洗,蒸馏水洗。
15.用5%硫代硫酸钠处理5min。
16.脱水,透明,封固。
(三)结果
神经纤维:棕色至黑色。
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