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现代荧光免疫分析技术前进和展望

时间:2023-04-24 理论教育 版权反馈
【摘要】:比如TRFIA法中常用的镧系离子有4种,利用它们分别对反应体系中不同的反应物进行标记,然后再利用不同元素之间有不同的荧光光谱的特点逐一进行检测,就可以在同一反应体系中对多种反应物进行检测,这无疑可以大大减少检测工作量。比如,TRFIA法中稀土元素在酸性条件下形成强荧光的体系相对较少,因此可以考虑在固相表面建立中性荧光增强体系,增加测定的灵敏度。

1.荧光免疫分析方法与其他技术联用

荧光免疫虽然具有灵敏度高、测试方法简便等优势,但在药物检测过程中有时会因发生交叉反应而出现假阳性。而利用色谱技术对药物的高辨认度,与免疫分析联用,可能消除或者降低这一现象。目前,临床上已经有多种高效液相色谱和免疫分析的联用方式并相继应用于地高辛、利多卡因等体内药物的测定。该法既保证了检测的高灵敏度,又能提高准确度。此外,荧光免疫与GC、LC-MS等的联用也逐渐步入正轨。

2.多组分分析物免疫分析

多组分分析物免疫分析即在同一份样品中同时测定2种或2种以上的相关分析物的免疫分析技术。比如TRFIA法中常用的镧系离子有4种(铕、铽、钐和镝),利用它们分别对反应体系中不同的反应物进行标记,然后再利用不同元素之间有不同的荧光光谱的特点逐一进行检测,就可以在同一反应体系中对多种反应物进行检测,这无疑可以大大减少检测工作量。最近在国内外同时分析多种药物的成功范例也有很多,如下面的“7.4.8应用实例”中将介绍一种多成分同时测定的荧光免疫分析手段。

3.开发更加灵敏的荧光增强体系,增加测定的灵敏度

目前荧光免疫分析技术的检测灵敏度已经达到了一般检测水平的要求,但随着分析技术的发展,仍有希望建立一种更优的检测体系。比如,TRFIA法中稀土元素在酸性条件下形成强荧光的体系相对较少,因此可以考虑在固相表面建立中性荧光增强体系,增加测定的灵敏度。此外,将不同的荧光免疫手段偶联或者与其他免疫分析方法相结合有可能降低检测限,提高反应灵敏度。

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