【摘要】:亲和毛细管色谱是指在电泳过程中,在CZE缓冲液或CGE凝胶中加入抗原或抗体,使得具有生物专一性亲和力的两种分子之间发生特异性相互作用,形成受体-配体复合物,通过研究作用前后电泳谱图的变化,可获得亲和力大小、结构变化等方面的信息。毛细管电泳的诸多分离模式和优点,也使其有可能成为蛋白质及多肽类药物最有效的分离手段之一。
亲和毛细管色谱(affinity capillary electrophoresis,ACE)是指在电泳过程中,在CZE缓冲液或CGE凝胶中加入抗原或抗体,使得具有生物专一性亲和力的两种分子之间发生特异性相互作用,形成受体-配体(抗原-抗体)复合物,通过研究作用前后电泳谱图的变化,可获得亲和力大小、结构变化等方面的信息。通常用于核酸片段的特性识别、蛋白相互作用研究、竞争性免疫分析、药物-受体和药物-蛋白质相互作用的研究。Rush等人利用亲和机制,根据缓冲液中离子对庚烷磺酸与红细胞生成素的作用,改善了分辨率,所得谱图可区分糖肽和非糖基化合物肽,至少能分辨出12中种糖肽类型。Liu等利用ACE技术比较了3种细菌的五肽前体与万古霉素的亲和力大小,并经质谱分析证明其末端结构。方梅等人研究了一种在线微透析三电极系统ACE法,并在生理条件下分析了牛血清白蛋白组分。
高效毛细管电泳已经发展成为一种基础性的分析工具,广泛应用到各个领域。为了适应生命科学的研究需要,毛细管电泳技术将进一步向芯片化、集成化及自动化的方向发展。目前用于蛋白质和多肽类药物分析的仪器和方法,自动化程度不高,操作繁琐、耗时的凝胶电泳仍然是蛋白质分离的主要工具,随着毛细管电泳技术的不断发展成熟,自动化的毛细管电泳仪最终会取代凝胶电泳而广泛应用于蛋白质分析。毛细管电泳的诸多分离模式和优点,也使其有可能成为蛋白质及多肽类药物最有效的分离手段之一。
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