【实验目的】
1．观察红细胞在不同低渗溶液中的情况，学会测定红细胞脆性的方法和配制不同浓度的NaCl溶液，加深对渗透压、红细胞渗透脆性等知识的理解。
2．正确判断和记录实验结果，根据结果分析血浆晶体渗透压的生理意义。
【实验原理】 正常情况下，哺乳类动物红细胞内的渗透压与血浆渗透压相等，约相当于0.9％NaCl溶液的渗透压。因此，将红细胞悬浮于等渗的NaCl溶液中，其形态和容积可保持不变。若红细胞置于低渗的NaCl溶液中，则水分进入红细胞使之膨胀甚至破裂溶解发生溶血。故临床上常用不同浓度的低渗NaCl溶液来测定红细胞膜的渗透脆性。开始出现溶血现象的低渗盐溶液浓度为该血液红细胞的最小抵抗力，即最大脆性（正常值为0.42％～0.46％NaCl溶液）；出现完全溶血时的低渗溶液浓度，则为该血液中红细胞的最大抵抗力，即最小脆性（正常值为0.32％ ～0.34％ NaCl溶液）。对低渗盐溶液的抵抗力小表示红细胞的脆性大，反之表示脆性小。
【实验用品】 家兔、试管架、10ml小试管10支、滴管、2ml注射器1个、8号针头、1％NaCl溶液、蒸馏水、1ml吸管2支。
【实验步骤】
1．低渗NaCl溶液的配制 取小试管10支，编号排列在试管架上，按实验表2-1所示成分加入试管，配制10种浓度的低渗NaCl溶液。
2．加抗凝血 用干燥的2ml注射器，从兔耳缘静脉取血1ml，向每支试管内各加1滴，摇匀，在室温下静置1h。
3．结果判断 根据各管混合液的颜色和混浊度的不同，判断最大脆性和最小脆性。所出现的现象可分为下列三种：
（1）未发生溶血的试管：液体下层为混浊红色，上层为无色透明，表明无红细胞破裂。
（2）部分溶血的试管：液体下层为混浊红色，而上层出现透明红色，表明部分红细胞已破裂，称为不完全溶血。出现不完全溶血的最大低渗盐溶液，是该血液红细胞的最小抵抗力，表示红细胞的最大脆性。
（3）全部溶血的试管：液体完全变成透明红色，表明红细胞完全破裂，称为完全溶血。出现完全溶血的最大低渗溶液，为该血液红细胞的最大抵抗力，表示红细胞的最小脆性。
4．记录 开始溶血的NaCl溶液浓度与完全溶血时的NaCl溶液浓度，即红细胞脆性范围。
实验表2-1 不同浓度的NaCl溶液配制表
【注意事项】
1．配制不同浓度的低渗盐溶液时，小试管的口径与大小应一致。加抗凝血量要准确一致，只加1滴。
2．混匀时，用手指堵住试管口，轻轻倾倒1～2次，减少机械震动，避免人为的溶血。
3．抗凝剂最好用肝素，其他抗凝剂可改变溶液的渗透压。
【分析与思考】
1．红细胞在低渗溶液中为什么会出现体积膨胀甚至破裂？
2．红细胞并不是被置于低渗溶液中就会立即破裂，其中机制如何？
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