【实验目的】
1.学会用玻片法测定ABO血型,并说明注意事项。
2.根据测定结果确定血型。
【实验原理】 红细胞膜上的血型抗原与相应的血型抗体会发生凝集反应(A抗原与抗A抗体相遇或B抗原与抗B抗体相遇时要发生红细胞凝集反应)。因此,根据是否发生红细胞凝集反应,用已知的标准血清的抗体(即A型标准血清含抗B,B型标准血清含抗A)去测定受检者红细胞膜上未知的抗原,再以测定到的抗原来确定血型。
【实验用品】 显微镜、采血针、A型和B型标准血清、双凹玻片、小试管、试管架、吸管、竹签、生理盐水、75%酒精棉球、消毒棉签、玻璃蜡笔。
【实验步骤】
1.标记 取干净双凹玻片一块,用玻璃蜡笔在两端分别标明A、B字样。
2.采血 以75%酒精棉球消毒中指指端腹侧(或耳垂)。待酒精自然挥发后,用消毒采血针刺破皮肤,采血1滴。
3.红细胞混悬液的制备 将采血针采的血置于盛有1ml生理盐水的试管内摇匀。
4.加样
(1)在两侧凹面内各加一滴红细胞混悬液。
(2)在A端、B端凹面中央分别滴A型和B型标准血清各一滴.注意不可混淆。
(3)分别用竹签使其充分混匀。放置10~15min。
5.观察 用肉眼观察有无凝集现象,肉眼不易分辨者用低倍显微镜观察。结果判断见第三章第四节图3-12。
【注意事项】
1.采血针和采血时必须严格消毒,以防感染。
2.制备红细胞混悬液不能过浓或过稀,以免造成假结果。
3.滴标准血清的滴管和作混匀用的竹签各2只(根),专用,两种标准血清绝对不能混淆。
4.注意区别凝集现象与红细胞叠连。发生红细胞凝集时,肉眼观察呈朱红色颗粒,且液体变得清亮。
【分析与思考】
说明ABO血型系统的分型依据;阐明血型与输血的关系。
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