【实验目的】 在急性实验条件下施加多种因素影响尿的生成过程,并观察尿量的变化。
【实验原理】 尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收及肾小管和集合管的分泌。
【实验对象】 家兔。
【实验用品】 哺乳类动物手术器械、计算机生物功能实验系统、压力换能器、受滴器、保护电极、铁支架、双凹铗、婴儿称、三通开关、膀胱漏斗、注射器(1ml、5ml、10ml、20ml)及针头、肝素生理盐水、20%氨基甲酸乙酯、20%葡萄糖溶液、1/10 000去甲肾上腺素、呋塞米、垂体后叶素。
【实验方法及步骤】
1.接通所用仪器的电源 将压力换能器的导线端所选的通道,压力腔侧口接一个三通开关,压力腔正中口经一个三通开关接动脉托管,测压管道内充满肝素生理盐水。将受滴器的输出与记滴输入连接,电刺激输出与保护电极连接。
2.麻醉、固定动物 家兔称重后,经耳缘静脉缓慢注入20%氨基甲酸乙酯(5ml/kg),待动物麻醉后将其仰卧固定于兔手术台上。
3.手术 剪去颈部兔毛,沿颈部正中切开皮肤,分离气管并插入气管插管,结扎固定。分离右迷走神经,穿线备用。分离左颈动脉,远心端结扎,用动脉夹夹闭近心端。在结扎处的稍下方剪一小斜口,插入动脉插管,结扎固定。松开动脉夹,观察血压。
4.尿液收集 在耻骨联合上缘向上做4cm长的正中切口,沿腹白线剪开腹壁及腹膜,找到膀胱。轻提膀胱在其腹侧血管较少处剪一小口,插入充满生理盐水的的膀胱漏斗,使漏斗口对准两输尿管的膀胱入口,将膀胱壁结扎固定在漏斗上。用可调双凹夹固定受滴器,受滴器的电极端稍微向下倾斜,使尿滴垂直落在受滴器两电极上。
【观察项目】
1.记录正常尿量和血压。
2.静脉中速注射38℃生理盐水20ml,观察尿量和血压的变化。
3.电刺激迷走神经近心端。在右侧迷走神经的头端结扎,在结扎点的头端剪断,电刺激迷走神经近心端,使血压维持在6.5kPa 5~10s,观察尿量和血压的变化(刺激方式为连续单刺激;频率为20~50/s;波宽为0.3~0.5ms;强度为7~10V)。
4.静脉注射20%葡萄糖溶液5ml,观察尿量和血压的变化。
5.静脉注射1/10 000去甲肾上腺素0.3ml,观察尿量和血压的变化。
6.静脉注射呋塞米5mg/kg,观察尿量和血压的变化。
7.静脉注射垂体后叶素0.5ml(6U/ml),观察尿量和血压的变化。
8.整理实验结果,关闭所用仪器的电源。
【注意事项】
1.术中动作要轻柔,避免血管、神经及膀胱、输尿管损伤。
2.每次实验都需生理指征恢复正常后再进行下一项实验。
3.尿生成实验项目顺序可灵活掌握,如插管后无尿可先进行尿糖定性实验。
(罗桂霞)
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