猫爪草有机酸部位的药理作用

（一）材料

有机酸部位：取100g药材70%乙醇提取浓缩液，加水至100ml，用6moL／L的HCl调pH至2，用乙酸乙酯萃取（50ml×3次），合并乙酸乙酯萃取液减压浓缩至1／3后，用pH12的碱水萃取（25ml×3次），合并碱水层调pH至2，用乙酸乙酯萃取（50ml×3次），合并乙酸乙酯萃取液减压回收乙酸乙酯，得浸膏即为有机酸部位。

（二）方法和结果

1．改良罗氏培养基　经消毒纱布过滤的新鲜鸡卵液1　000ml和450ml培养基缓冲盐溶液、2%孔雀绿水溶液20ml混匀，取上述混合液和药液9∶1的比例混匀，分装于20ml痰瓶，斜面高度约占痰瓶的2／3，90℃1．5h凝固。冷却后，37℃无菌试验24h。4℃保存，1个月内使用。

（1）H37RvBBL菌液：用接种环挑取一环H37Rv结核菌标准菌株有毒株接种于7ml BBL培养管中，混匀后放入BACTEC　960仪中，仪器报阳性后涂片镜检确认，检查无污染，3d后使用（菌浓度105～106CFU／ml）。

（2）接种：将H37RvBBL菌液用5%Tween－80无菌生理盐水1∶100稀释（菌浓度103～104CFU／ml），放置30min，充分混匀，取0．1ml接种于改良罗氏培养基上，斜转动培养管，使菌液铺满斜面。放置30min后置37℃孵箱中孵育，4周观察结果，记录菌落数。

2．结核菌药敏试验结果　以二倍法稀释提供药液，同时以蒸馏水作空白组进行试验，计算相对于空白组的抑菌率。抑菌率（%）＝1－试验组菌落数空白组菌落数×100%。

采用体外结核菌药敏试验和气相色谱－质谱用技术（GC－MS），研究了猫爪草有机酸部位的药理作用及化学组成。结果表明，药材的有机酸部位具有抗结核作用，并有量效关系；GC－MS分析表明，含有多种有机酸成分。由此可知，有机酸部位应为药材的抗结核有效部位之一。