药品中微量砷盐的限量检查，《中华人民共和国药典》2010年版采用古蔡氏法（第一法）和二乙基二硫代氨基甲酸银法（第二法）。
以下介绍常用的古蔡氏法，其原理为：锌与酸反应产生新生态的氢，与供试品中的砷盐反应生成挥发性的砷化氢（AsH3），砷化氢与溴化汞试纸作用产生黄色至黑棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液用同法处理所得砷斑比较，用于供试品中砷盐的限量检查。反应方程式如下：
As3＋＋3Zn＋3H＋→3Zn2＋＋AsH3↑
AsO3－3＋3Zn＋9H＋→3Zn2＋＋3H2O＋AsH3↑
AsH3＋3HgBr2→As（HgBr）3（黄色）＋3HBr
2As（HgBr）3＋AsH3→3AsH（HgBr）2（棕色）
As（HgBr）3＋AsH3→As2Hg3（黑棕色）＋3HBr
3．2．1 测定装置
检定装置如图3－1所示，A为100ml标准磨口锥形瓶；B为中空的标准磨口塞，上连导气管C（外径8．0mm，内径6．0mm），全长约180mm；D为具孔的有机玻璃旋塞，其上部为圆形平面，中央有一圆孔，孔径与导气管C的内径一致，其下部孔径与导气管C的外径相适应，将导气管C的顶端套入旋塞下部孔内，并使管壁与旋塞的圆孔相吻合，黏合固定；E为中央具有圆孔（孔径6．0mm）的有机玻璃旋塞盖，与D紧密吻合。
3．2．2 操作步骤
（1）检砷装置的准备（图3－1）。导气管C中装入醋酸铅棉花60mg（装管高度为60～80mm），再于旋塞D的顶端平面上放一片溴化汞试纸（试纸大小以能覆盖孔径而不露出平面外为宜），盖上旋塞盖E并旋紧，即得。依法准备两套检砷装置。
（2）加样。在其中一套检砷装置的A瓶中精密加入标准砷溶液2ml，加盐酸5ml与水21ml。在另外一套检砷装置的A瓶中加入按各品种项下规定的方法制成的供试品溶液。
（3）反应。再在以上两个A瓶中分别加碘化钾试液（临用新制）5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10min后，加锌粒2g，立即将导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置于25～40℃水浴中反应45min。
（4）砷斑检视。取出溴化汞试纸，将供试品的砷斑与标准砷斑比较，观察颜色深浅，判定结果。
3．2．3 注意事项
（1）新购置的检砷装置使用前应检查是否符合要求。不同的装置制备的标准砷斑，颜色应一致；同一套装置对标准砷溶液1．5ml和2．0ml所显砷斑的颜色应有深浅的区别。
（2）检砷装置导气管的直径应一致。因为砷斑的颜色深浅与砷斑的直径大小直接相关，如果直径不一致难以准确判定结果。
（3）严格管理三氧化二砷。三氧化二砷为剧毒物质，须建立健全验收、保管、领发、核对等制度，专柜加锁并由专人保管。
（4）正确在导气管内装入醋酸铅棉花。用量约为60mg，装管高度60～80mm。装管时，先将醋酸铅棉花撕成疏松状，每次少量用细玻璃棒均匀地装入导气管，要保持干燥，不要塞入近下端广口处。
（5）平行操作及时观察。制备标准砷斑或标准砷对照液，应与供试品检查同时进行。砷斑不稳定，在反应中应保持干燥并避光，并立即比较。
（6）选择合适大小的锌粒。应用粒径为2mm左右的锌粒，如使用的锌粒较大，用量应酌情增加，反应时间应延长为1h。
（7）选择合适的制备溴化汞试纸的滤纸。应选用中速定量滤纸。用定性滤纸，所显砷斑色调较暗，砷斑深浅梯度无规律；用质地疏松的定量滤纸，所显砷斑色调鲜明，有梯度规律。
（8）标准砷贮备液存放时间一般不宜超过1年。
（9）应根据供试品规定含砷限量确定供试品的取样量。古蔡氏法反应灵敏度约为0．75μg（以As计），砷斑色泽的深度随砷化氢的量而定，药典规定标准砷斑为2ml标准砷溶液（相当于2μg的As）所形成的色斑，此浓度得到的砷斑色度适中，清晰，便于分辨。供试品规定含砷限量不同时，采用改变供试品取用量的方法来适应要求，而不采用改变标准砷溶液取量的方法。
图3－1 第一法仪器装置
3．2．4 操作示例
【例】 复方乳酸钠葡萄糖注射液砷盐的检查。按《中华人民共和国药典》2010年版二部规定检查。
测定法：
（1）标准砷溶液的制备：称取三氧化砷0．132g，置于1 000ml量瓶中，加20%氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量的稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置1 000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于1μg的As）。
（2）标准砷斑的制备：精密量取标准砷溶液2ml置于一套检砷装置的A瓶中，加盐酸5ml与水21ml，再加碘化钾试液5ml与酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10min后，加锌粒2g，立即将已装好的导气管C密塞于A瓶上，并将A瓶置于25～40℃水浴中，反应45min，取出溴化汞试纸，即得。
（3）供试液的制备：取本品40ml，置水浴上蒸发至约5ml，加稀硫酸5ml与溴试液1ml，再在水浴上蒸发至约5ml，放凉，加盐酸5ml与水18ml。
（4）检查法：将供试液置于另一套检砷装置的A瓶中，照标准砷斑的制备，自“再加碘化钾试液5ml”起，依法操作。
（5）观察：将供试品生成的砷斑与标准砷斑比较，不得更深。
3．2．5 检验记录
检验原始记录中应包括：供试品取样量、标准砷溶液取用量、操作过程、实验结果等信息。表3－2为上例的砷盐检查记录。
表3－2 复方乳酸钠葡萄糖注射液砷盐检查（古蔡氏法）原始记录
3．2．6 遇到问题怎么办
（1）问：古蔡氏砷盐检查法中，遇到供试品本身可以产生能与溴化汞试纸反应生成深色斑点的物质，干扰砷斑检查，该怎么办？
答：供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等，在酸性溶液中可生成硫化氢或二氧化硫气体，能与溴化汞试纸作用，生成黑色的硫化汞或金属汞，干扰砷斑的检查。供试品可加硝酸处理使其氧化成硫酸盐以除去干扰。
（2）问：遇到有机药品该如何检查砷？
答：①可溶于水的脂肪族有机酸及其盐，如葡萄糖酸钙，可直接依法检查砷盐。②多数环状结构的有机药物，因砷能与杂环结构形成共价键结合，须经过有机破坏处理后再进行检砷。一般方法是：取一定量的供试品，加入等量无砷氢氧化钙混匀后，加水湿润，烘干，用小火小心炽灼至烟除尽，再在500～600℃炽灼至灰化，使供试品中的砷成为非挥发性的亚砷酸钙，再依法检查砷，并同时做空白试验。
（3）问：如何制备溴化汞试纸和醋酸铅棉花？
答：①溴化汞试纸：取质地较疏松的中速定量滤纸条浸入乙醇制溴化汞试液中，1h后取出，在暗处干燥，保存于棕色具塞玻璃瓶内备用。②醋酸铅棉花：取脱脂棉1．0g，浸入醋酸铅试液与水（1∶1）的混合溶液12ml中，湿透后，挤压除去过多的溶液，并使之疏松，在100℃以下干燥后，保存于具塞玻璃瓶内备用。
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