染色体要查哪些项目

具有下列情况之一者可能患染色体病,须进行细胞遗传学检查。①有明显的智力发育不全、生长迟缓或伴有其他先天畸形者;②夫妇中有染色体异常,如平衡易位、嵌合体等;③家族中已发现染色体异常或先天畸形个体;④习惯性流产的妇女及其丈夫;⑤原发闭经和男女不孕症者;⑥34岁及以上的高龄孕妇;⑦有两性内、外生殖器畸形者;⑧无精子症和男性不育症;⑨疑为唐氏综合征的患儿及其父母;⑩原因不明的智力低下伴有大耳、大睾丸和多动症者。常用检查项目有性染色质检查、染色体检查和荧光原位杂交。

(一)性染色质检查

多数性染色体病患者在性发育前异常表现不突出,易被忽视。他们常在性发育后或婚后不育不孕才就医,此时睾丸或卵巢已退化,导致不治。因此,性染色体病治疗的关键在于早期发现,而当今情况还难于检查每位婴幼儿的染色体,染色质检查对筛查性染色体病可以发挥独到作用。

性染色质检查方法的特点:对患者无损伤、方法简捷、结果迅速,只用于性染色体病的筛查。

1.X染色质的检查

(1)标本采集:可刮取颊部口腔黏膜、阴道黏膜脱落上皮细胞、头发根鞘细胞等,亦可采用绒毛或羊水中胎儿脱落细胞。

(2)检查程序:包括取材→固定→染色→镜检计数X染色质数目。个体的X染色体数目=X染色质数+1。

如某患者男性,有1个X染色质,该患者X染色体数为2,性染色体可能为XXY,怀疑为克兰费尔特综合征,应做染色体核型检查以确诊。

2.Y染色质检查 Y染色体长臂的一部分,能吸附荧光染料,在荧光显微镜下可见细胞核内荧光小体即Y染色质。检查适用于Y染色体数异常个体的筛查,如XYY综合征患者的筛查。

(二)染色体检查

1.检查标本 外周血淋巴细胞、绒毛和羊水中胎儿脱落细胞、脐带血、受精卵卵裂细胞、肿瘤细胞等所有具有分裂能力的细胞。

2.检查程序 包括取样与样品预处理→接种与细胞培养→滴片和染色→镜检与核型分析等步骤。

临床多采用染色体G带核型分析。通过该方法可准确地检出100多种染色体畸变综合征和其他异常核型。近年来由于染色体显带技术的发展和方法学上的不断改进,已能制备1 000条以上的清晰的染色体带型(高分辨带),从而使微小的染色体畸变亦能判别。因而不断地有新的人类异常核型发现,为人类染色体畸变的研究提供了越来越多的可借鉴的资料。但即使应用高分辨技术,也只能对>4.5Mb的DNA片断改变进行识别,对于更小的片断改变所致的染色体变化的染色体检查仍无能为力。

(三)染色体荧光原位杂交

为了识别染色体上<4.5Mb的DNA片断改变,分子细胞遗传学运用分子生物学方法在微细胞遗传学的基础上,在分子水平研究染色体结构或数目变化,更主要的是研究染色体某位点遗传物质的改变。其中临床常用方法之一是荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)。

1.FISH的特点 ①准确诊断染色体微小缺失和隐性易位以及基因定位;②诊断时间缩短;③不仅分裂细胞而且对间期细胞也可检查。

2.FISH检查程序 首先将生物素或地高辛标记的DNA探针与细胞、染色体或间期核的DNA或RNA杂交,再用荧光标记的相应抗体进行免疫检测和放大,根据荧光信号的有无或强弱判断该杂交位点有无变化。通过计算机图像处理系统,可获得生动的彩色染色体图像。

3.FISH应用范围 ①检测染色体微小缺失、插入、易位、倒位或扩增等结构异常;②鉴定标记染色体的来源和复杂易位;③可用于检测单倍体细胞如精子和卵裂细胞,为植入前诊断提供重要方法。