(五)病理学常用的观察方法
1.大体观察 主要通过对大体标本使用各种衡量器具对所检查的标本大小、形状、色泽、重量、表面及切面、病灶特性及硬度等进行细致的观察及定量检测的方法。是病理学检查必不可少的检查步骤,有经验的病理医师通过对大体标本的观察,往往能够初步确定病变的性质。
2.组织学观察 是对大体标本进行更进一步的观察方法,从大体标本中具有代表性的病变部位切取厚约0.3~0.5cm的组织,制作成厚约3~5um的组织切片,并经过不同的方法染色后,用光学显微镜观察其微细病变。组织学观察虽然是传统的病理学研究方法,但是到目前为止仍然是最常用、最基本、最可靠的病理学研究和诊断方法,仍具有不可替代的作用。
3.细胞学检查 是通过各种途径和方法采集人体病变组织的细胞,制成细胞涂片,利用显微镜对细胞的形态进行病理学观察,并做出相应的诊断。常用的方法:①脱落细胞学检查:如痰涂片,尿沉渣涂片,阴道分泌物涂片及胸、腹水涂片等;②刷刮细胞学检查:如支气管内镜刷片、子宫刮片、食管拉网等涂片;③穿刺细胞学检查:如体表肿块穿刺、肝穿刺、淋巴结穿刺等;④印片细胞学检查:如体表溃疡、手术切除的肿块和新鲜切取组织等用玻璃片直接粘取病变细胞进行检查。主要用于健康普查和肿瘤的早期诊断。
4.超微结构观察 运用透射、扫描电子显微镜对细胞内部及表面超微结构进行更加细微的观察,即从亚细胞和大分子水平上了解细胞的病变。但是由于放大倍率过高,观察具有局限性,常需结合大体观察和组织学观察才能做出正确判断。
5.组织化学和细胞化学观察 是利用某些能与细胞或细胞外基质中的特殊成分相亲和的化学染料进行染色,从而显示出不同颜色的方法来鉴定组织中的某些特殊物质(如蛋白质、核酸、酶类、糖类以及脂类等),又称为特殊染色。组织化学和细胞化学观察对一些代谢性疾病有一定的诊断价值。另外,在肿瘤的诊断和鉴别诊断中,特殊染色也是常用的方法之一。
6.免疫组织化学观察 免疫组织化学则是利用抗原抗体高度特异性的结合反应与组织化学的定位性、呈色性相结合,检测组织或细胞中的许多微量物质,如细胞膜抗原、肿瘤相关抗原、激素、细胞骨架蛋白、某些基因表达蛋白以及某些病原微生物等。
除以上常用观察方法外,近年来新技术层出不穷,如放射自显影技术、显微分光光度技术、流式细胞术、图像分析以及多聚酶链反应等一系列分子生物学技术,运用这些新的研究方法和技术,使我们对疾病发生、发展的规律逐渐获得更为深入的了解,使病理学快速进入新的发展时期。
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