实验六 影响血液凝固的因素
一、实验目的
以血液凝固时间作为指标，通过测定各种条件下血液凝固的时间，来了解一些影响血液凝固的因素。
二、实验原理
血液流出血管后很快就会凝固，在此过程中有多种凝血因子参与，受多种理化因素影响。根据启动凝血过程的激活因子来源不同，可将血液凝固途径分为内源性凝血途径和外源性凝血途径。内源性凝血途径是指参与血液凝固的全部凝血因子都存在于血浆中；而外源性凝血途径是指组织因子进入血管，和血管内的凝血因子共同启动血液凝固过程。
本实验直接从动物动脉放血，血液几乎不和组织因子接触，因此，我们观察的凝血过程主要是内源性凝血途径的作用。
三、实验对象
家兔。
四、实验器材
哺乳类动物手术器械1套、动脉插管、动脉夹、烧杯2个、10mL试管8个、带橡皮刷的玻璃棒或竹签、滴管、秒表、棉花等。
五、实验药品
20%氨基甲酸乙酯溶液、石蜡油、肝素、草酸钾、生理盐水、肺组织液等。
六、实验步骤和观察项目
1.动物手术
（1）麻醉与固定 取家兔1只，称重，然后按5mL/kg体重（1g/kg体重）从耳缘静脉缓慢注射20%氨基甲酸乙酯溶液，进行麻醉，麻醉成功后将兔仰卧位固定于手术台上。
（2）颈部手术 正中切开家兔颈部，分离一侧颈总动脉，取丝线两条从其下方穿过。一条线将颈总动脉远心端结扎，以阻断血流。动脉近心端则用动脉夹夹住，在靠近结扎线的血管上剪一小口，插入动脉插管，并用另一条备用线固定动脉插管，以备取血。
2.观察项目
（1）打开动脉夹，取兔动脉血10mL，分别注入两个小烧杯内，一杯静置作为对照，另一杯用带有橡皮刷的玻璃棒或竹签轻轻搅拌。数分钟后，待玻璃棒或竹签上结成红色血团，便取出用水清洗，同时观察纤维蛋白的情况。然后对比两杯的凝血情况。
（2）取8支干净的小试管，按表3－6－1准备各种不同的实验条件。向每支试管中滴入兔动脉血2mL，立刻秒表计时。每隔20s将试管缓慢倾斜1次，观察血液是否凝固，直到血液成为凝胶状不再流动为止。将各管血液凝固的时间记录于表3－6－1中，以1号试管为对照，比较其他各管的凝血过程是加速了还是延缓了。
表3－6－1 影响血液凝固的因素
七、注意事项
1.取血过程要尽量快，以减少计时的误差，记录凝血时间应力求准确。
2.实验中的小烧杯、试管必须清洁、干燥。
3.每支试管的口径及加入的血液量要尽量一致，不可相差过大，以免影响结果。
4.判断凝血的标准应力求一致。一般以试管倾斜45°时，管内血液不见流动为准。
八、思考题
1.试分析该实验每一项结果产生的原因。
2.肝素和草酸钾都能抗凝，其原理一样吗，为什么？
3.加速或延缓血液凝固有什么临床意义？
4.正常人体内的血液为什么不会发生凝固？
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