实验三 大脑皮层诱发电位
一、实验目的
1.学习记录大脑皮层诱发电位的方法。
2.观察大脑皮层诱发电位的波形。
二、实验原理
大脑皮层诱发电位是指感觉传入系统受到刺激时,在大脑皮层上某一局限区域所引发的电位变化。皮层诱发电位可以寻找感觉投射部位,研究大脑皮层功能定位,是了解中枢神经系统功能活动的一种重要指标和研究方法。由于皮层不断活动可产生波幅较大的自发电位,因此诱发电位经常出现在自发电活动的背景上。为了降低皮层的自发电活动,使诱发电位清晰的引导出来,实验时常将动物深度麻醉。同时,由于诱发电位的潜伏期主反应比较恒定,并与刺激有较严格的锁时关系,可利用计算机生物信号处理系统的叠加技术,使诱发电位通过叠加幅度加大,而自发脑电和噪音是随机的,叠加可互相抵消,从而使诱发电位从自发脑电背景和噪音中分离出来。
三、实验对象
家兔或豚鼠。
四、实验器材
哺乳类动物手术器械1套、兔手术台、保护电极、皮层引导电极(直径1mm的银丝,头端呈球形)、颅骨钻、小咬骨钳、明胶海绵、BL-420F生物信号采集处理系统、脑立体定位仪等。
五、实验药品
液体石蜡、生理盐水、20%氨基甲酸乙酯溶液等。
六、实验步骤和观察项目
1.动物准备
(1)麻醉 取较大成年家兔1只,称重。用20%氨基甲酸乙酯溶液(或用10%氨基甲酸乙酯溶液与1%氯醛糖混合麻醉剂)按1g/kg(即5mL/kg)的剂量从耳缘静脉缓慢注射进行麻醉,麻醉深度以维持呼吸在20~24次/min为宜,此时的自发脑电较小。麻醉成功后仰卧位固定于兔手术台上。
(2)颈部手术 切开颈部皮肤,分离出气管并做气管插管。
(3)分离左坐骨神经 将家兔转成俯卧位,剪去左侧大腿背外侧毛,于大腿中部纵行切开皮肤,用止血钳钝性分离股二头肌与半腱肌,在深部找到粗大、色白的坐骨神经并分离出左侧坐骨神经。
(4)分离右浅桡神经 剪去右侧前肢兔毛,切开皮肤后,逐渐钝性分离上肢肌肉后,暴露出右侧浅桡神经。
(5)头部手术 头皮消毒,在头顶正中线切开头皮50~70mm,暴露颅骨骨缝,在矢状缝右侧20~100mm、人字缝前50~100mm处用骨钻钻孔,再用骨钳扩大(图10-3-1),勿伤及正中线血管以免引起大出血。骨缝出血时应及时用骨蜡封闭。用小镊子夹起硬脑膜,然后用眼科剪剪开硬脑膜(注意不要损伤皮质),滴上38℃的液体石蜡,以保护皮层,术后放松家兔头及四肢。
图10-3-1 兔颅骨开孔位置
2.安放电极
(1)通过电极操纵器小心将皮层引导电极移至皮层表面,确保良好接触,但不可压力太大而伤及脑组织,电极尾端与BL-420F生物信号采集处理系统输入端相连。参考电极夹在动物头皮边缘上,妥善接地。
(2)把保护电极安放在坐骨神经上,并用浸有38℃液体石蜡的棉条覆盖,把皮肤切开处用止血钳夹闭,保护电极与BL-420F生物信号采集处理系统的刺激器输出相连。
3.打开计算机,进入BL-420F生物信号采集处理系统,点击“实验/实验项目”,在子菜单中单击“中枢神经实验”,选择“大脑皮层诱发电位”实验模块,点击开始,系统开始工作,调节适当的实验参数,即可进行实验观测。
4.观察项目
(1)给予刺激,观察皮层诱发电位是否出现(图10-3-2) 以单个脉冲刺激左坐骨神经,可见左侧后肢轻微抖动,逐渐增加刺激强度,观察是否有皮质诱发电位出现。如果记录的诱发电位不明显,可移动引导电极,逐点探测,寻找诱发电位幅度最大且恒定的区域。一般在刺激伪迹之后出现一稳定的电位变化,波形由主反应和后发放两部分组成。主反应一般在刺激后5~12ms出现,即潜伏期为5~12ms,为先正后负的电位变化。后发放是主反应之后出现的一系列正相的周期性电位变化。
(2)以同样的方法刺激右浅桡神经,观察与刺激左坐骨神经引出的皮质诱发电位有何不同。
(3)视觉诱发电位 将引导电极置于皮质视区,其他电极位置不变。将光源对准动物一侧眼睛(可在家兔右眼上睑缝一针固定于眶上皮肤,以充分暴露右眼)。光源开关与计算机扫描同步,按启动按钮触发扫描,同时给予光刺激,观察视觉诱发电位、诱发电位数与刺激强度的关系以及适应现象等,或探讨不同感觉刺激在皮质同一位置引出的诱发电位,探讨同一感觉刺激在皮质不同部位引出的诱发电位。
图10-3-2 兔皮层诱发电位(叠加)
六、注意事项
1.动物麻醉适当深度,使自发脑电波抑制,诱发电位才会明显的显现出来。
2.手术过程中要注意避免损伤皮层血管。一旦血管破裂出现血凝块,将影响实验结果。
3.引导电极不要压得太紧,以免损伤皮层。
4.神经和皮层注意保温和防止干燥。在剪开脑膜后,要经常更换温热液体石蜡,因为大脑神经细胞对温度变化十分敏感。
七、思考题
1.如何区别皮层诱发电位与自发脑电位?
2.大脑皮层诱发电位有何特征?其产生机制如何?有何生理与临床意义?
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