肾上腺摘除后的观察

实验一　肾上腺摘除后的观察

一、实验目的

1.学习动物肾上腺摘除的方法，了解研究内分泌腺功能的一般方法。

2.观察动物摘除肾上腺后的存活率、肌肉紧张度、姿态活动、游泳运动的变化，加深对肾上腺重要生理功能的理解。

二、实验原理

肾上腺位于肾脏的前上端，分皮质和髓质两部分。肾上腺皮质主要释放糖皮质激素、盐皮质激素及少量性激素，而髓质主要分泌肾上腺素和去甲肾上腺素。其中，肾上腺皮质激素是维持生命活动所必需的。糖皮质激素的主要功能是增强机体对有害刺激的耐受能力，调节机体应激反应，并能参与体内糖、蛋白质和脂肪的代谢调节；盐皮质激素则主要参与调节水盐代谢。因此，动物摘除肾上腺后，会迅速出现应激能力降低，对炎症、过敏、寒冷等有害刺激的耐受力下降，糖、蛋白质、脂肪代谢紊乱，水盐代谢失衡等，最终动物会因循环衰竭而死亡。

三、实验对象

小白鼠。

四、实验器材

手术器械1套、棉球、蛙板、大烧杯、秒表、天平、大玻璃缸。

五、实验药品

乙醚、75%乙醇、生理盐水。

六、实验步骤和观察项目

1.动物分组

挑选20只成熟、健康、体重相近的小白鼠分别进行称重编号，随机将其分成2组：对照组和实验组，每组各10只，雌雄数量各半。

2.双侧肾上腺摘除

将实验组的小白鼠扣在大烧杯中，用乙醚棉球将其麻醉，俯卧位固定于蛙板上。剪去白鼠背部的毛，75%乙醇消毒，沿背部正中线从第10胸椎向后做一1～2cm的皮肤切口。用镊子夹住皮肤边缘，向一侧牵动切口，在肋骨下缘肋脊角处分离肌肉，剪开腹腔。将腹腔内的脏器略微上推，直至暴露肾脏及其上方的粉黄色肾上腺。用眼科镊轻轻摘除肾上腺，不要弄破被膜，若有出血，轻压止血即可。用同样的方法摘除对侧肾上腺。最后缝合背部切口，并用75%乙醇消毒缝合口。

对照组的小白鼠也要进行同样的手术，但并不摘除肾上腺。

3.术后动物饲养

手术后，将两组动物在同样的条件下饲养1周，尽量保持室温在20～25℃，高热量、高蛋白喂食，充分供应饮水。

4.观察项目

（1）观察肾上腺摘除对小白鼠存活率的影响 手术后，小白鼠按上述方法饲养7d，于第8天分别统计两组白鼠的存活率，将存活的白鼠分别称重、记录。最后，将实验组和对照组的白鼠存活率、体重变化情况列表比较。

（2）观察肾上腺摘除对小白鼠的姿态活动、肌肉紧张度的影响 将术后饲养7d仍存活的小白鼠从第8天开始禁食2d，只供饮水。到第10天，选取实验组和对照组的小白鼠各2只，置于实验台上，观察并比较它们在禁食2d后，姿态活动和肌肉紧张度的变化。

（3）观察肾上腺摘除对小白鼠游泳运动的影响 同样，取禁食2d的两组小白鼠各3只，将其放入4℃左右的冷水中游泳，用秒表记录各组白鼠的游泳时间，直到该组白鼠全部溺水下沉为止。最后，比较两组小白鼠的游泳运动时间。

（4）观察小白鼠游泳运动后的恢复情况 将溺水下沉的小白鼠及时捞起，分别观察并记录两组小白鼠恢复活动的时间及活动情况，进行比较。

七、注意事项

1.手术前先要掌握麻醉的深浅度，不可过深。

2.为避免实验中动物的混淆，可先将动物进行编号。

3.在对小白鼠进行肾上腺摘除手术时，动作要尽量轻柔，不要用力按压，以免造成动物窒息死亡。

4.手术过程中，应注意避开血管，尽量减少出血。

5.手术后的动物尽量分开单独饲养，以免相互撕咬。

6.要保持实验组和对照组的饲养环境相同。

八、思考题

1.肾上腺摘除后的小白鼠和对照组的小白鼠在冷水中游泳的能力和溺水后恢复活动的时间有什么不同？试分析为什么呢？

2.根据这个实验，你能说出肾上腺具有哪些功能吗？