实验三 有丝分裂与减数分裂
一、实验目的
(1)了解有丝分裂和减数分裂临时压片的制作方法。
(2)熟悉有丝分裂和减数分裂各个时期的特点。
(3)掌握有丝分裂和减数分裂的异同点。
二、实验用品
光学显微镜、擦镜纸、二甲苯、载玻片、盖玻片、吸水纸、洋葱、滴管、广口瓶、培养皿、镊子、盐酸乙醇溶液(1∶1)、1%甲紫溶液、橡皮头、雄蝗虫、剪刀、卡诺固定液(无水乙醇与冰醋酸的体积比为3∶1)、95%乙醇、70%乙醇、醋酸洋红染液、解剖针、酒精灯等。
三、实验内容
(一)有丝分裂
1.洋葱根尖临时标本片制作的准备工作
实验前3~7d,取洋葱放在盛有清水的广口瓶上,使洋葱的底部接触到水面,放在温暖的地方培养。待根长出1~2cm后,就可以剪取健壮的根尖制成切片。
2.洋葱根尖临时标本片制作
(1)将洋葱根在距离根尖0.5cm处剪断,立即放入盛有盐酸乙醇溶液(1∶1)的培养皿中固定约5min。
(2)待根尖变酥软后,用镊子小心将根尖取出,放入盛有清水的培养皿中漂洗约10min。
(3)将漂洗后的根尖放入盛有1%甲紫溶液的培养皿中染色约5min。
(4)用镊子夹取漂洗后的根尖放在载玻片上,加入一滴清水,盖上盖玻片,用橡皮头小心把根尖压平(可使细胞分散),再用吸水纸吸去多余的染色液。
3.洋葱根尖有丝分裂的观察
将制作好的洋葱根尖临时标本片放置在光学显微镜下,先在低倍镜下找到染色较深的部位(此处为根的生长区)。转换高倍镜观察此处细胞,可见许多处于有丝分裂不同分裂期的细胞(各时期细胞特点如实验图3-1)。
实验图3-1 洋葱根尖细胞有丝分裂示意图
注:(a)、(b)为前期;(c)、(d)为中期;(e)、(f)为后期;(g)、(h)为末期。
(二)减数分裂
1.雄蝗虫减数分裂临时标本片的制作
(1)将雄蝗虫置于玻璃皿上,用剪刀小心剪去雄蝗虫的头和翅,然后仔细剪开体壁,找到精巢(位于体壁上方两侧各一的黄色圆块)。
(2)取出精巢,放入盛有卡诺固定液(无水乙醇与冰醋酸的体积比为3∶1)的培养皿中固定0.5~1h。
(3)取出精巢,移入盛有95%乙醇的培养皿中浸泡15min,然后浸泡在盛有70%乙醇的培养皿中长期备用。
(4)取出精巢,置于盛有醋酸洋红染液的培养皿中染色0.5~1h。
(5)用解剖针挑取1mm大小精巢,置于载玻片上,滴一滴醋酸洋红染液,盖上盖玻片。
(6)置于酒精灯上加热2~3次,用吸水纸吸去多余的染液和水,压片。
2.雄蝗虫减数分裂的观察
将制作好的雄蝗虫减数分裂临时标本片放置在光学显微镜下,先在低倍镜下找到染色较深的细胞。转换高倍镜观察此处细胞,可见许多处于减数分裂不同分裂期的细胞(各时期细胞特点如实验图3-2)。
实验图3-2 雄蝗虫减数分裂示意图
四、实验报告
(1)绘制洋葱根尖细胞分裂各期形态图。
(2)比较有丝分裂、减数分裂的异同点。
杨元元
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