组胺对大鼠血管壁通透性的影响

第三节　组胺对大鼠血管壁通透性的影响

实验目的

学习测定腹腔染料通透量的实验方法，观察组胺对大鼠毛细血管通透性的影响。

实验原理

组胺（histamine）是广泛存在于人体组织的自身活性物质。组织中的组胺主要含于肥大细胞及嗜碱性粒细胞中。肥大细胞颗粒中的组胺常与蛋白质结合，物理或化学等刺激能使肥大细胞脱颗粒，导致组胺释放。

组胺作用于靶细胞表面的H1、H2受体而产生炎症效应，主要表现为扩张小血管，增加微血管通透性，导致血液成分渗出，诱发急性炎症性充血反应，腹腔注射组胺后，立即通过尾静脉注射染料伊文思蓝（Evans blue，EB），测定腹腔染料通透量，可判定炎性渗出的多少。

实验对象及相关用品

1.实验对象

大白鼠。

2.实验相关用品

分光光度计，离心机，大鼠固定筒，注射器（1mL、5mL），试管，离心机，解剖剪，眼科镊，0.1mg/mL磷酸组胺，1%伊文思蓝生理盐水溶液，生理盐水。

实验分组

实验分两组，包括实验组与对照组。

观测指标

分别测定两组腹腔洗出液量、腹腔洗出液光密度值。

实验步骤

取160～200g大鼠，随机分为实验组与对照组。两组均按0.1mL/10g，尾静脉注射染料1%伊文思蓝生理盐水溶液，然后实验组立即腹腔注射0.1mg/mL磷酸组胺0.2mL，而对照组立即腹腔注射生理盐水0.2mL，20min后断头放血处死大鼠，剪开腹腔，用5mL生理盐水洗涤腹腔数次，收集洗涤液，1000r/min离心5min，用分光光度计在590nm处测定吸光度（OD值）。实验结束后，将各组结果汇总，列表7-1比较。

表7-1　组胺对大鼠毛细血管通透性的影响

注意事项

（1）注入的染料量、组胺量及自注射组胺至处死的时间必须严格掌握。

（2）冲洗腹腔时应避免液体外溢。

（3）解剖时应避免腹腔出血。

实验报告要点

除注意实验报告的正规书写格式外，要求根据所学理论知识，阐明各组间不同实验结果的发生机制。

思考题

1.为什么注入的染料量、组胺量及自注射组胺至处死的时间必须严格掌握？

2.为什么剪开腹腔时要避免腹腔出血及冲洗腹腔时要避免液体外溢？

3.从试验结果，试比较组胺和生理盐水对血管通透性的影响有何不同，解释组胺引起血管通透性改变的机制是什么？

（牡丹江医学院　杨旭芳）