家兔内生致热原性发热

第二节　家兔内生致热原性发热

实验目的

（1）学习掌握家兔内生致热原性发热模型的复制方法。

（2）观察肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）致家兔发热时的症状，了解家兔内生致热原性发热时的体温变化规律以及机体的功能与代谢变化特点。

（3）加深对内生致热原致家兔发热机制的理解。

实验原理

TNF-α主要由脂多糖等激活的单核-巨噬细胞分泌的一种小分子蛋白质。小剂量的TNF-α直接作用于体温调节中枢，上调体温调定点，使机体产热增加，散热减少，体温升高，出现单相热。大剂量的TNF-α可出现双相热，第一热相是TNF-α直接作用于体温调节中枢所致，第二热相则是TNF-α通过作用于单核-巨噬细胞，促使其分泌白细胞致热原即白介素-1而引起的。本实验通过耳缘静脉注射小剂量的重组TNF-α（recombinant TNF-α，rTNF-α）复制家兔内生致热原性发热模型，了解rTNF-α引起的单相热的特点，理解rTNF-α在发热发生机制中的作用。

实验对象及相关用品

1.实验对象

健康家兔（雌雄均可，体重2.0～3.0kg）。

2.实验相关用品

台秤，兔台，5mL注射器，医用人体肛温表，液体石蜡，无热源生理盐水，rTNF-α（用无热源生理盐水稀释成0.5μg/mL），BL-420生物机能实验系统，张力传感器，蛙心夹。

实验分组

实验分为正常对照组和内生致热原性发热模型组。

观测指标

（1）体温：通过观察静脉注射rTNF-α引起家兔内生致热原性发热时的体温变化趋势，了解小剂量rTNF-α所引起的单相热的特点。

（2）心率：了解rTNF-α引起家兔内生致热原性发热时循环系统的功能变化。

（3）呼吸频率和呼吸幅度：了解内生致热原性发热时呼吸系统的功能变化。

（4）恶寒、耳廓充血和球结膜充血：了解rTNF-α导致家兔内生致热原性发热时的皮肤产热和散热变化特点。

（5）排尿：理解内生致热原性发热时水和电解质代谢的变化特点。

（6）排便：了解内生致热原性发热时消化系统功能的改变。

实验步骤

（1）取健康家兔4只，随机分为正常对照组和内生致热原性发热模型组。

（2）家兔称重后仰卧位固定于兔台上。

（3）连接传感器，描记呼吸。

①将蛙心夹夹在胸廓活动最明显处的胸壁上，另一端用丝线系于张力传感器感应片的小孔上。张力传感器与BL-420生物机能实验系统的1通道连接。

②打开电脑，运行BL-420生物机能实验系统，进入系统主界面，在输入信号下拉菜单的1通道中，选择张力，开始记录正常家兔呼吸频率和幅度。

（4）观察并记录各组家兔的一般情况：基础体温（肛温），恶寒（竖毛），耳廓（耳根温度、静脉的颜色和充盈度），球结膜（充血程度），呼吸（频率和幅度），心率，排尿，排便等。

（5）内生致热原性发热模型组经耳缘静脉注射无热源生理盐水稀释的rTNF-α（0.5μg/mL），剂量为2mL/kg；正常对照组由耳缘静脉注入无热源生理盐水（2mL/kg）。

（6）注射完毕后密切观察上述指标的变化并记录，其中肛温在注射rTNF-α后，每10min测1次，共100min。

注意事项

（1）家兔应健康，雌雄均可，雌性无孕，体温正常（38.5～39.5℃）。

（2）rTNF-α无热源生理盐水稀释液从4℃冰箱取出后，应先在37℃的水中温浴20min，然后再使用。

（3）每次测量家兔肛温时，需将医用人体肛温表甩到35℃以下，末端涂少许液体石蜡，轻轻试探着插入肛门内3.5～4cm，插入时不得用力太猛或旋转体温计，置肛门内3min后取出，查看体温计读数。

实验报告要点

（1）实验题目：家兔内生致热原性发热。

（2）实验目的：语言简练、目的明确。

（3）实验原理：阐述通过耳缘静脉注射rTNF-α来复制家兔内生致热原性发热模型的实验原理。

（4）实验对象：家兔。

（5）实验材料。

（6）观测指标。

（7）实验步骤：简要书写主要操作步骤，不要照抄实验指导，要简明扼要。

（8）实验结果：实验结果记录见表8-2。要及时、详细、准确记录家兔内生致热原性发热时的体温、心率、呼吸频率、呼吸幅度的变化特点和家兔发热时的恶寒、耳廓充血、球结膜充血、排尿排便等表现。实验结果记录要实事求是，切忌编造数据。

表8-2　家兔内生致热原性发热实验结果记录

（9）分析讨论：应紧扣实验结果，以家兔发热时的体温、心率、呼吸频率、呼吸幅度的变化特点和家兔发热时的恶寒、耳廓充血、球结膜充血、排尿排便等表现为切入点，用所学的理论知识解释rTNF-α导致家兔内生致热原性发热时家兔出现这些变化的机制，阐明其代偿意义，进而理解发热时机体功能代谢变化的机制及代偿意义。

（10）实验结论：根据内生致热原性发热时家兔出现的功能代谢变化归纳出的一般的概括性判断，对本实验所能验证的概念、原则或理论的进行简明总结。

（11）实验分工：写出在家兔内生致热原性发热实验中本组成员所负责的具体工作。

思考题

1.分别给家兔注射小剂量和大剂量的rTNF-α引起家兔发热的特点有什么不同？其机制如何？

2.如果通过耳缘静脉注射大剂量的rTNF-α来复制家兔内生致热原性发热模型，你认为应该怎样修改实验方案？

（天津医科大学　张利军）