大鼠失血性休克

第一节　大鼠失血性休克

实验目的

（1）制备大鼠失血性休克模型并观察其表现。

（2）探讨失血性休克的发病机理。

（3）观察依达拉奉对大鼠失血性休克的疗效并探讨其机制。

实验原理

采用对大鼠股动脉处快速放血的方法复制失血性休克的动物模型，利用解剖显微镜动态观察肠系膜微循环血流动力学的改变；依达拉奉是一种自由基清除剂，能抑制黄嘌呤氧化酶和次黄嘌呤氧化酶的活性，通过尾静脉注射依达拉奉进行治疗，观察其对大鼠失血性休克的治疗作用。

实验对象及相关用品

1.实验对象

雄性Sprague Dawley（SD）大鼠，体重为300～400g。

2.实验相关用品

（1）药品：3%戊巴比妥钠溶液，生理盐水，微循环灌流液（含1%明胶的台氏液），0.3%肝素钠生理盐水溶液，依达拉奉。

（2）器材：大鼠手术器械1套，大鼠板，BL-420生物信号采集分析系统，压力传感器，三通阀，微循环观察装置（解剖显微镜、灌流盒），静脉输液装置，储血瓶，动脉导管和静脉导管，动脉夹，温度计，100mL烧杯，1mL、5mL注射器，止血纱布，电子秤。

观测指标

（1）血流动力学参数：体动脉压平均值（MAP）、脉压（Ps-d）、心率（HR）。

（2）微循环参数：微血管（微动脉、微静脉）内血流速度、微血管口径、毛细胞血管开放数目/视野、白细胞附壁及嵌塞现象。

（3）体温（测直肠温度）。

（4）皮肤及口腔黏膜颜色。

（5）呼吸。

实验分组

（1）生理盐水治疗组。

（2）依达拉奉治疗组。

实验步骤

（1）取雄性SD大鼠一只称重后，给予3%戊巴比妥钠按1mL/kg剂量腹腔内注射麻醉。

（2）将大鼠仰卧固定于大鼠板上，剪去手术区被毛，在甲状软骨下做颈部正中切口（长约2cm），分离气管，做倒“T”形切口，插入“Y”形气管插管并固定，保证呼吸通畅，并将插管的一侧接呼吸描记装置，描记呼吸；分离一侧颈总动脉，插入动脉导管，经压力传感器（插管前在动脉导管和压力传感器导管部分充盈肝素，以防止凝血后堵塞血压传导通路）与BL-420生物信号采集与分析系统相连，记录MAP、Ps-d、HR。

（3）在左侧股三角区域触及股动脉后，沿动脉行走方向做长约1cm切口，游离左股动脉后插入含肝素聚乙烯导管，在其尖端之前用动脉夹股动脉，导管另一端与含0.5mL肝素钠盐水的注射器相连，以备放血。

（4）在剑突下方1cm处向下沿正中线做长约2cm的腹正中切口，沿腹白线打开腹腔，找出一段游离度较大的小肠肠袢，轻轻拉出，置于微循环灌流盒内，用解剖显微镜观察肠系膜微循环情况。

（5）将温度计插入直肠，测体温。

（6）记录各项指标后，通过含0.5mL肝素钠盐水的注射器抽取血液（0.6mL/min）直到平均动脉压降到40mmHg，必要时根据情况抽取更多的血液或回输部分血液使动脉压维持在40mmHg水平，持续60min，记录各项指标及储血瓶内血量。

（7）停止放血，从尾静脉注入依达拉奉药液3mg/kg（2mL/kg）（生理盐水治疗组则输入生理盐水2mL/kg），注入完后记录治疗后5、15、30、60min时的各项指标。

注意事项

（1）麻醉深浅要适度，过深可严重抑制呼吸；过浅则动物疼痛挣扎，影响观察，甚至引起神经源性休克。

（2）牵拉肠袢动作要轻柔，以免引起严重低血压，影响休克实验。

（3）尽量减少手术出血，分离血管时，应钝性分离，切勿使用手术刀或手术剪；出血时应设法止血。

（4）所有动、静脉导管及压力传感器内均应充盈肝素生理盐水，并排尽气泡。

（5）压力传感器高度均应与心脏水平一致。

（6）观察微循环时，分清动脉、静脉及毛细血管，选好标志血管，固定视野，以保持前后观察结果一致。

实验报告要点

着重讨论失血性休克的发生、发展机制以及依达拉奉的治疗作用及其机制。

思考题

1.试分析本实验动物发生失血性休克的机制。

2.试分析本次实验所复制的模型属于休克哪个期。