【摘要】：若所用载体为红细胞，即称间接血凝实验，如载体为乳胶颗粒，则叫间接乳胶凝集实验。将IgG经63℃，10min处理，可获得变性的IgG)。
实验8 间接凝集实验
(Indirect agglutination test)
【目的】
了解间接凝集实验的原理、方法及其实际意义。
【原理】
本实验是将已知的可溶性抗原吸附或耦联在与免疫无关，有一定大小的颗粒性物质(载体颗粒)表面上，然后再与相应抗体混合，并在有适当电解质存在的条件下，由抗原抗体的特异性结合而发生肉眼可见的载体颗粒凝集。该实验可用于细菌、病毒、钩体、梅毒螺旋体抗体，以及某些自身抗体(如抗核抗体、抗肾抗体、抗甲状腺抗体)等的检测。
可用作载体的物质有红细胞(如Rh-O型血红细胞、绵羊红细胞、兔红细胞等)、聚苯乙烯乳胶颗粒、活性炭以及硅酸铝颗粒等。若所用载体为红细胞，即称间接血凝实验，如载体为乳胶颗粒，则叫间接乳胶凝集实验。
【材料】
1.类风湿乳胶诊断试剂(即吸附了人变性IgG的聚苯乙烯乳胶，又称为致敏乳胶。将IgG经63℃，10min处理，可获得变性的IgG)。
2.待检血清、阳性对照血清、阴性对照血清。
3.背面涂有墨汁或黑漆的载玻片。
4.毛细滴管等。
【方法】
1.用生理盐水将待测血清稀释1∶20。
2.用毛细滴管吸取1∶20待测病人血清一滴于载玻片上，然后加一滴类风湿免疫诊断试剂。
3.持玻片轻轻晃动使之充分混匀。5min内出现均匀的乳白色凝集颗粒者为阳性，无凝集者为阴性。
【结果】
以肉眼观察出现凝集为阳性，不出现凝集为阴性。玻片法为定性测定，也可以用试管法作定量测定。
【注意事项】
1.试剂应保存在4℃，切勿冻存。使用前应使试剂接近室温并摇匀。
2.日光灯光线不利于观察结果。
3.因放置过久可出现假阳性，所以应在5min内观察结果。
【思考题】
间接凝集实验的主要机理及用途是什么?
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